文档介绍：乙肝两对半测定-酶联免疫法实习生:廖於波指导老师:李海龙HBV是乙型病毒性肝炎的病原体。HBV感染呈世界性流行,但不同地区感染的流行程度差异很大。据WHO报道,全球约20亿人曾感染过HBV,,每年约有100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌。%。乙肝病毒血清标志物HBsAg?第一个出现,感染后1-2周即可阳性?阳性表示存在HBV感染HBsAb?出现在HBsAg消失后?保护性抗体?疫苗免疫成功的标志乙肝病毒血清标志物HBeAg?病毒复制标志?传染性强HBeAb?传染性降低?长期存在是DNA与肝细胞整合的结果乙肝病毒血清标志物HBcAg?HBV复制的标志?血清中难以检测出来IgM-HBcAb?急性HBV感染IgG-HBcAb?急性感染恢复期和慢性持续感染检测HBV病毒血清标志物是临床最常用的病原学诊断方法。HBV具有三个抗原抗体系统,即乙肝表面抗原(HBSAg)和乙肝表面抗体(HBsAb)、e抗原(HBeAg)和e抗体(HBeAb)、核心抗原(HBcAg)核心抗体(HBcAb),由于HBcAg在血液中难于检出,故临床免疫学检测不包括HBcAg,目前常采用酶联免疫法和化学发光法检测。酶联免疫吸附实验原理用于检测包被于固相板孔中的待测抗原(或抗体)。即用酶标记抗体,并将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使抗原抗体反应在固相载体表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除,最后通过酶作用于底物后显色来判断结果。颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。乙肝病毒血清标志物检测原理不显色(+)HBcAbHBcAg竞争法HBcAb不显色(+)HBeAb及中和抗原HBeAb竞争法HBeAb显色(+)HBeAbHBeAb夹心法HBeAg显色(+)HBsAgHBsAg夹心法HBsAb显色(+)HBsAbHBsAb夹心法HBsAg结果判断标记或结合物包被试剂原理血清学标志标本本要求采集:血浆:使用抗凝血浆管(枸橼酸盐、EDTA盐、肝素之一为抗凝剂)采集样品。样品离心分离后,提取血浆用于检测。血清:采用正确医用技术采集标本。离心分离后,提取血清样品用于检测。标本要求储存:样品可存放于2~8℃冰箱,24小时内测定。若需长时间保存,则应冻存于-20℃以下,避免反复冻融。上述样品使用前应恢复到室温,轻轻摇动混匀。若标本有沉淀物形成,应离心除去,并确定未变质方可使用。严重融血或脂血标本不可使用。