文档介绍:第卷第期暨南大学学报医学版. .
年月.
一反义寡核苷酸对肝癌细胞增殖及凋亡的影响
吴风云, 蒋建伟, 张洹
,.血液病研究所,广东广州
摘要目的:探讨髓样细胞白血病..反义寡核苷酸对肝癌细胞增殖及凋亡的影响。
方法:将一转染人体外培养的肝癌细胞。
细胞增殖抑制率;,用染色在荧光
显微镜下观察细胞凋亡的形态学改变。结果:.作用细胞后,与空白对照组
和随机寡核苷酸对照组相比,.组能明显抑制肝癌细胞的增殖和诱导其凋亡
.,组细胞出现期明显的阻滞;染色可见大量的细胞核固缩,核碎裂。结论:
能抑制肝癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡。
关键词髓样细胞白血病.; 反义寡核苷酸; 凋亡; 肝癌细胞
中图分类号. 文献标识码文章编号———
—, .,
.;.,,,,
:一
. :
.
;
,
.:一
, , —
一
.,一
,,
,.:—
—
.
; ; ;
【收稿日期—一
基金项目广东省医学科研基金项目
作者简介】吴风云~.女,硕士研究生,研究方向:反义技术治疗
通讯作者:蒋建伟。:—;—:.
第期吴风云,等:一反义寡核苷酸对肝癌细胞增殖及凋亡的影响
髓样细胞白血病一一, 调细胞浓度为/,接种孔板,每孔
基因是一家族成员之一,其编码的蛋白,设组、组终浓度为.、
过表达具有抑制凋亡的作用¨,在多种肿瘤的发生.、.、. 、组终浓度为.
发展中起着重要的作用,运用一反义寡核苷酸,每组设个复孔,待细胞贴壁率达%时
—,也在血液加人药物,每孑最终体积为。置培养箱培养
系统以及消化系统等多肿瘤细胞中发挥了促凋亡的,取出孔板,每孔加入一试剂,微板
作用一。振荡器振荡混匀,放人培养箱中继续培养.,酶
肝癌是我国高发且治疗效果不佳的一种恶性肿标仪检测各孔的吸光值测定波长:,参考波
瘤,近年来研究表明一在肝癌组织中呈高表长:。计算各组抑制率,抑制率对照组
达,本研究采用一抑制一的表达, 吸光度一实验组吸光度/对照组吸光度% 。
观察其对肝癌细胞增殖及凋亡的影响,为肝单染取对数生长期细胞,调细胞浓度
癌治疗提供一种新治疗的实验依据。为×/,接种于孔板,总体积,后
加人药物,设组组、组终浓
材料与方法
度为.、组终浓度为.、.
. 反义核酸的合成/,培养后,消化收集细胞,离心/
一反义寡核苷酸序列,随机寡核,,弃上清。重悬细胞,离心、洗涤
苷酸序列均由北京赛百盛基因技术有限公次。用体积分数为% 乙醇℃固定过夜。上机
司合成,全程硫代修饰,经软件检索与人类前用预冷的洗涤次后,加入碘化丙锭—
基因无序列同源性。一序,染色液含酶,终质量浓度
列为:’一.., 序/,避光染色,流式细胞仪分析细胞
列为:’一一’。含量的变化,每个样本随机分析,个细胞,得
. 主要试剂到各组细胞周期比例。
转染试剂上海生博生物技术有限公—双染取对数生长期细胞,
司,含酚红/培养基与新生牛血清. 调细胞浓度为/,接种于孑板,总体积
公司,一一试剂日本同仁,后加人药物,设组