文档介绍：分析化学实验报告实验名称:反相高效液相色谱法测定雪碧中的苯甲酸专业:化学教育班级:11化学班姓名:指导教师:郭老师日期:、实验目的1、学****高效液相色谱仪的操作。2、了解高效液相色谱法测定苯甲酸的基本原理。3、掌握高效液相色谱法进行定性及定量分析的基本方法。实验原理苯甲酸为具有苯或甲醛的气味的鳞片状或针状结晶,具有苯或甲醛的臭味。℃,沸点249℃,(15/4℃)。在100℃时迅速升华,它的蒸气有很强的刺激性,吸入后易引起咳嗽。微溶于水,易溶于乙醇、***等有机溶剂。苯甲酸是弱酸,比脂肪酸强。苯甲酸是重要的酸型食品防腐剂。在酸性条件下,对霉菌、酵母和细菌均有抑制作用,但对产酸菌作用较弱。~,~。在食品工业用塑料桶装浓缩果蔬汁,;在果酱(不包括罐头)、果汁(味)型饮料、酱油、;在软糖、葡萄酒、;在低盐酱菜、酱类、蜜饯,;。用高效液相色谱法将饮料中的苯甲酸与其它组分(如:柠檬酸(钠)、蔗糖等)分离后,将已配制的浓度不同的苯甲酸标准溶液进入色谱系统。如流动相流速和泵的压力在整个实验过程中是恒定的,测定它们在色谱图上的保留时间tR和峰面积A后,可直接用tR定性,用峰面积A作为定量测定的参数,采用工作曲线法(即外标法)测定饮料中的苯甲酸含量。三、仪器和试剂1、Agilent1220高效液相色谱仪。2、色谱柱:KromasilC18,5µ150×。3、流动相:75%甲醇(色谱纯)+25%PH=(过三次)。4、苯甲酸标准贮备溶液:%苯甲酸,用过三次的蒸馏水溶解,定量至50mL容量瓶中,并稀释至刻度。标样浓度217μg·mL-1。4、测饮料试液:雪碧四、、、、、、、·mL-1的标准系列溶液,并贴上标签。(稀释为50mL)谱仪器条件:泵的流速:;检测波长:254nm;进样量:20μL;柱温:室温。仪器基线稳定后,进苯甲酸标准样,浓度由低到高。品处理如下:(1)将约100mL雪碧置于一100mL洁净、干燥的烧杯中,用超声波脱气10min,以赶尽雪碧中二氧化碳。取5mL雪碧样品转移至50mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度。将雪碧样品注入2mL样品瓶中备用。“Agilent1220高效液相色谱仪操作规程”分析饮料试液。结果处理C=:图1样品谱图为下图2:图23、各浓度及