文档介绍：南华大学
硕士学位论文
DAXX过表达对氧化应激诱导HepG<,2>细胞凋亡的影响
姓名:熊国祚
申请学位级别:硕士
专业:病理学与病理生理学
指导教师:曹建国
20070501
过表达对氧化应激诱导。细胞凋亡的影响摘要研究背景:肝癌是威胁人类健康和生命的常见恶性肿瘤之一,其死亡率在肿瘤死亡顺位中位居第三。但肝脏肿瘤药物的治疗选择性和抗性是限制药物疗效的主要问题。药物促进肿瘤细胞凋亡虽然是多途径的,而肿瘤细胞的凋亡过程异于正常的细胞,表现为一系列的癌基因被激活并过表达,这些癌基因表达产物可以直接刺激肿瘤细胞生长,阻断肿瘤细胞的凋亡,同时降低肿瘤细胞对药物敏感性。重建肿瘤细胞的凋亡信号转导系统,促进肿瘤细胞死亡基因的表达或抑制生存基因的作用是我们研发肿瘤治疗药物的又一强有力的靶点。死亡结构域相关蛋白不仅通过介导瓺蛲鐾罚箍勺魑V琢錾ひ蜃藕磐飞系南游前凋亡受体来促进细胞凋亡;可以敏化多种肿瘤细胞的凋亡过程,但对于肝肿瘤细胞株蛲龅挠跋焐腥狈ξ南鬃柿稀1臼匝橹荚谘芯緿匀肝癌赴┪锏拿舾行缘挠跋旒盎啤方法:用脂质体转染法分别转染和狢籇饬礁鲈靥宓紿细胞,并建立稳定细胞株,用逆转录聚合酶链反应检测的表达;实验分组如下:6哉兆未转染细胞组空载体转染组#疓细胞狢籇泶镌靥遄H咀:/狣赴。用过氧化氢孵育小时诱导细胞凋亡,采用法测定细胞活性和流式细胞术检测分析蛋白的表达。结果:经筛选稳定的细胞运用技术分析其,结果显示转染绿色荧光蛋白表达载体的细胞的明显上调;用荧光显微镜观察到蛋白主要定位于细胞核。我们用过氧化氢诱导赴蛲觯鄄斓焦氧化氢呈浓度依赖性地抑制赴钚浴U6哉障赴海疓、。/狣橄赴腎!V捣直鹗.、./2⑶椅颐窃擞昧式细胞仪检测到:/狣橄赴蛲雎拭飨愿哂谧H究赵靥逯柿W橛胛细胞凋亡率,甦產
转染组±..L崾綡术#疓细胞对过氧化氢的反应性较未转染细胞和:/舾小N颐腔褂τ脀检测到活化的在转染组细胞表达最强,达到ィ而未转染和:/.±.ィ徊剿得了可以增加赴杂诠趸獾拿舾行浴M蔽颐枪鄄斓焦趸处理小时后,转染组细胞磷酸化的泶锩飨愿哂诳赵靥遄H咀楹臀转染细胞组。结论:稍黾尤烁伟〩细胞对过氧化氢诱导凋亡的敏感性;鞍酌艋趸庥盏糎细胞凋亡可能与协同增加钚关键词:,。细胞,细胞凋亡,过氧化氢,本实验由湖南省卫生厅基金钅亢臖,。有关。..
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主要缩略语英文索引死亡结构域相关蛋白死亡因子受体应激活化蛋白激酶流式细胞仪二甲基亚酚半胱天冬氨酸酶磷酸缓冲盐溶液碘化丙啶过氧化氢凋亡率四甲基偶氮唑盐一一粂———’!猟!猘’。!
⋯钐科,聊虢铀赴期:纠以“⋯名:勿才印,日期:∽年石月∥日关于学位论文使用授权说明原创性声明本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了论文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文;学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。/
肝癌是威胁人类健康和生命的常见恶性肿瘤之一。每年,我国约万人死于肝癌,占全世界肝癌死亡人数的%。并且由于死亡率高,在肿瘤死亡顺位中仅次于胃癌、食道癌而位居第三,甚至在部份地区的农村中则占第二位,仅次于胃癌【D壳埃伟┑淖酆闲灾瘟迫涨鞴娣痘┪锏闹瘟蒲≡裥院涂剐是限制药物疗效的主要问题【俊尽管药物促进肿瘤细胞凋亡是多途径的,但都可以间接或直接启动细胞凋亡或死亡信号通路。该信号分子主要是通过两种死亡因子受体殖艫或椭琢龌邓酪蜃邮芴胂嘤Φ牧街炙劳鲆蜃:現籘琓岷弦院笏シ是年等在用酵母双杂交筛选成年鼠芴逅劳鼋峁褂蚪合蛋白时首次发现,是一种定位于细胞核亚核结构⋯早幼粒细胞白血病蛋白┗蚪峁褂暮说鞍譴刚,并广泛分布于哺乳动物和人正常组织细胞以及肿瘤细胞。鼠嗦个氨基酸,⒈硐殖高度保守·鷗。许多研究表明通过其羧基末端芴褰岷嫌蛴隖受体死亡结构域结合,启动信号调节激酶甁凋亡信号通路【】,从而促进肿瘤细胞凋亡。并且作为一种重要的信号分子,还可以转移到胞浆,介导肿瘤坏死因子受体超家族成员促凋亡信号的转导【】。文献【】报道转移,。并且在蛉毕菪统晒侨饬鱿赴闟细胞上外源性导入高表达的将增加转移生长因子