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多杀菌素高产菌种的推理选育和发酵工艺的优化.pdf

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文档介绍

文档介绍:浙江大学
硕士学位论文
多杀菌素高产菌种的推理选育和发酵工艺的优化
姓名:张苑
申请学位级别:硕士
专业:生物化工
指导教师:岑沛霖;金志华
20040301
摘要多杀菌素怯煞畔呔烫嵌噫呔鶶酵产生的新型生物杀虫剂。多杀菌素具有生物农药的安全性,化学合成农药的速效性,对哺乳动物、昆虫天敌、环境无害和独特的作用机理等优点,使它在世界各地被种植者们广泛使用并可获得快速登记。本论文对多杀菌素生产菌的选育及发酵生产进行了系统地研究,重点进行了多杀菌素的定量方法,高产菌种的推理选育,发酵工艺优化及初步小试等方面的研究。确定了采用高效液相色谱法对&⒔鸵褐卸嗌本氐暮拷胁定。该方法的相对标准偏差为ィ湟煜凳.%,线性相关系数为,平均回收率为.%,可以作为多杀菌素的定量研究方法。根据多杀菌素的生物合成途径和代谢调节机理,对多杀菌素产生菌刺糖多孢3龇⒕辏次紫外线诱变,分别筛选多杀菌索抗性突变株、鼠李糖对多杀菌素的摇瓶发酵工艺进行了研究,优化了培养基组成和培养条件,考察了碳源、氮源、无机盐、前体物质及其补入时间、等因素对多杀菌素发酵的影响。同时对平板培养基,斜面培养基,种子培养基进行了系统的优化,使菌以摇瓶发酵实验为基础,进行了多杀菌素发酵由摇瓶到⒔凸薜姆糯螅⒔凸奚隙嗌本氐姆⒔偷ノ淮锏/雀镁忠∑糠⒔褪碧岣吡鼠李糖抗性变株煌蜒跻籇一葡萄糖抗性变株进行推理选育,旨在获得高产菌株。以一抗性变株和煌蜒跻籇一葡萄糖剐员渲辏⒔岷献匀环掷氪炕钪获得高产突变株曼湟∑糠⒔托Ъ鄞/铣龇⒕晟能力提高了ァ株能达到较好的生长状态和更高的发酵产量,总结出一套适于菌体生长和提高发酵单位的培养方法。关键词多杀菌素刺糖多孢菌推理选育前体发酵培养基优化多杀菌菌素抗性变株浙江大学硕士学位论文%。
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全球范围化学杀虫剂的广泛使用,已导致严重的环境和抗性问题。因此,的机遇,并为世界提供了一类崭新的产品——多杀菌素。多杀菌素首先被陶氏农商业化,商品名叫做“菜喜”.治甘蓝的小菜蛾和棉花的棉铃虫。多杀菌素是一种绿色广谱杀虫剂,兼具生物农药的安全性和化学合成农药新型、高效、低毒、环保的生物杀虫剂品种的开发变得日益迫切。土壤中的一种放线菌刺糖多孢菌的发现带来了一个进一步发展生物杀虫剂的悬浮剂痛呱%的悬浮剂鸦竦弥泄┮┑牧偈钡羌牵直鹩糜诜的速效性。因其低毒,低残留,对天敌安全,对哺乳动物和环境无毒害,分解快素见效极快,药后当天见效,可用于防治各种鳞翅目缧〔硕辏蘖宄妫鸩夜蛾等暮Τ嬗壮妫且恢钟胖实奶烊慌┳魑锉;ぜ痢国内对多杀菌素的研究尚处于实验室小试阶段。本论文的研究工作主要包括进行多杀菌素高产菌株的推理选育,优化摇瓶发酵工艺和进行初步阶段的小试,以获得比较高产的菌株和适宜的发酵工艺,提高多杀菌素的发酵生产水平,取得较好的经济利益和社会效益。日Ⅱ业科学公司等优点而获得美国“总统绿色化学品挑战奖”【”。与一般的杀虫剂相比,多杀菌百浙江大学硕士学位论文
鷕物体韒药;。㈦。。植物錳゛﹑!#籥。。猯鵱鱣鱪颿第一章文献综述植。物瓷锘农药葬森琵圣荔矗弩一一⋯⋯“~怒篇‰墨煮嘉。转基骹;┮└攀⑸锾迮┮厂多菌妇鷌病警、线虫、微孢子虫等海旱镌瓷锘┮抗綯毒素拳等锘┮㊣:吝~。一。⋯⋯⋯⋯⋯⋯’⋯⋯⋯⋯⋯~生物农药/I骸6隺綼渐江足学砸士学位论叉锾迮┮Ю虫盐‘““毒紊、激素、防卫素、植物源昆虫激素、昆虫信息素、昆虫激素、毒素等生颾碼鷅物化学农药、!!!‘,廿瑅“癳,。琣。癱Ⅲ..
┮┑姆⒄埂定的发展。从年代起,发展非常迅速。该类农药在长期的研究和应用中所表现生物农药种类繁多,研究领域广,而我国在生物农药科研方面投入的资金与出的特点可初步归纳为以下几点:专一性强、活性高、对环境安全、对非靶标生物相对安全、开发利用途径多、作用机理不同于常规农药、种类繁多、研发的选择余地大等“K孀湃死嗷繁R馐兜脑銮考芭┮悼沙中⒄拐铰缘氖凳锱药作为一类高效安全的农药,必将具有广阔的发展前景。我国微生物资源丰富,发展生物农药的条件得天独厚。近年来,我国开发的生物农药及其它农药技术已得到国际农药界的关注。优先发展生物农药,并以生物农药带动其它高科技农药的全面发展,将成为我国农药产业发展的方向。随着科学技术的发展,我国已有苏云金杆菌、春雷霉素、灭瘟素、井冈霉素、公主岭霉素等生物农药实用化的商品。随着对生物农药研究的深入,将有更多的品种实用化,投入市场,在农业领域中应用。目前传统生物农药已经产业化,基因工程农药进入商品化,遗传工程作物已经接近实现。国外各大农药公司相比要少一些。因此,我国的生物农药研究和开发要根据现有基础和优势有针对地发展。近年来,国内外已陆续开发成功大批生物农药产