文档介绍：浙江大学
博士学位论文
酵母培养制备(1→3)-β-D-葡聚糖方法及相关基础研究
姓名:王亚军
申请学位级别:博士
专业:生物化工
指导教师:姚善泾
20040201
,匪锶绶直鸨硎菊崽恰⒘蛩犸Ш徒湍附鑫锏谋嗦胫蹬ǘ取8媚P陀摘要括侵匾5囊焕嗟ハ赴婢獗灰患嵊驳母招韵赴诎围,—.。斗一瓺一葡聚糖通过与巨噬细胞、嗜中性粒细胞和细胞上的受体相互作用,诱导生物活性,提疫促进物,还可用于治疗细菌、病毒、真菌和寄生虫引发的疾病。蚓哂薪虾竦南赴诙谎≡裎瓺一葡聚糖的生产菌株。在液体培养基的生长,畲蟊壬に俾省巍!.∑渴笛榭疾煊Q突肪程跫詓痸鞍纂耍琹%/酵母浸提物,培养温度。至~,接种量%/,摇床转速痬,装液量%/。随后,考虑到单因素试验设计的局限性,采用了响应面法对发酵培养基进行了优化。响应面法系数学与统计学的结合,它有助于快速建模、缩短优化时间和提高工程应用可信度。通生物量与培养基组分蔗糖、硫酸铵及酵母浸实际符合程度较高佃1淞糠治鼋沂荆诳疾旆段冢湍附鑫锒生物量收率影响程度最高,蔗糖次之,硫酸铵最弱。优化得到的发酵培养基为:。上罐发酵,,葡聚糖制各方法是基于酸碱反复萃取,这种方法的明显不足在于酸、碱试剂用量大、产物杂质含量高、劳动强度大和环境污染大。本工作提出了使用次氯酸钠氧化糖的思路。在考察了各种理化因素对细胞自溶率的影响后发现,。拢瑂溶率达到最值。自溶螅兹芙械帽冉铣沟住6矣肫胶馄诘腟赴谙啾冉希匀芟赴南赴诨颈3植槐洹@米匀芄探到狻⑷,广泛分布在细菌、酵母、蘑菇、真菌、谷物、海藻中。高宿主免疫功能,具有抗肿瘤和辐射保护作用,是哺乳动物、无脊椎动物的免锪坑跋斓幕∩希玫搅私嫌诺呐嘌跫%/葡萄糖,过响应面法建立了出物浓度之问的函数关系疞蔗糖,.疞硫酸铵,.疞酵母浸出物,—黄暇┞对,痸宜嵋阴芤褐校琒—籓.—;.浙江大学博士学位论文疞,疞疞。籓..,.一╥,
塑坚夹鸵罴岬妗!!!猅,其中,卢表示环境因子的效应。飕大,环境越利于细胞的增殖,环境越友好:触小,环境越不利于.,“”辟除细胞内的大分子物质,继而使用稀次氯酸钠溶液氧化&匀芟胞制各真菌斗一暇厶恰=柚谠K胤治觥⒑焱馕展馄准际鹾辨率与温度相关,温度越高,谱图分辨率提高:瓸—黄暇厶堑乃苄越深海微生物学和有机相生物转化以及细胞固定化工程中,常常要忍受高盐、高糖渗透应激作用。为了揭示渗透作用机制,考察了氯化钠、山梨醇、甘油和聚乙二醇等只衔锒阅J缴颕细胞生长、形态结构和代谢的影响。赴嘌峁砻鳎敢种谱饔盟孀派盖慷鹊脑黾右致加剧,抑制细胞比生长速率。当甘油浓度上升到全被抑制。增加环境中甘油浓度能增加细胞平均体积,并随着甘油浓度的提高,築值趋近于笥遥赴巫辞饔谇蛐危饧跎倭讼赴谋缺砻婊欣疞氯化钠和不影响最终残糖水平和生物量浓度。&由于具有刚性的细胞壁能耐受低渗应激处理,尝试通过了低渗应激诱导&啾龋蜕肪骋种屏讼赴诘脑龀ぃǖ蜕⒌渗交替作用对细胞壁的效应最明显。%,而低渗、等渗交替作用螅赴黄暇酆刻岣吡%。低渗、等渗交替作用能够刺激合成籶一葡聚糖。湫翁鸵胛幢ズ拖凳⑸缸饔茫玫搅一个描述不同渗透环境下&赮烫迮嘌系脑鲋衬P细胞的增殖,环境越恶劣。使用该模型,我们建立了一个定量描述不同渗透剂甘油、疞氯化钠和/视投杂Φ膒值分别为、、┕ひ瞪系挠τ谩1狙芯靠疾了超声波解聚和正丙醇硫酸酯作介质的非均相磺化反应对暇厶撬溶性的影响。。使用正丙醇硫酸酯非均相体系可以制各哼一狣一葡聚糖硫酸玫降亩嗵窍畃—黄暇厶恰—黄暇厶淄挤细胞在其自然栖息环境和工业培养过程如食品、制药工业、绿色化学合成、疞时,细胞增殖完于减少胞内水分的损失流量,从而保护了细胞。在生理可接受的渗透强度内,与对照组相比较,合成斗一暇厶恰S攵哉兆椋等渗环境的矗通过简化在不同浓度时的渗透抑制作用。对照组平板、疞氯化钠、/超声波解聚使多糖变得疏松,红外吸收光谱揭示,超声波处理并不影响一葡聚差。疞。浙江大学博涎宦畚
酯,产品呈白色,完全溶于水,.,每銎咸烟遣谢带有个磺酸基团。红外谱图、。超声波解聚和非均相磺化反应都可以使多糖变得疏松,使杂质容易从斗一一葡聚糖的构成的空间网格中释放出来,:面包酵母;辛一一暇厶牵号嘌簧锪浚幌煊γ娣ǎ蛔匀埽氧化;次氯酸钠;透射电镜;扫描电镜;元素分析:红外光谱:核磁共振;渗糖的纯度。透应激;增殖;建模:存