文档介绍：复旦大学
博士学位论文
Tbx1基因影响斑马鱼心脏发育机制的研究
姓名:张立凤
申请学位级别:博士
专业:儿科学
指导教师:桂永浩
20070416
刑英文缩略词表英文缩写英文全称中文名称心房心房收缩指数腮弓心房特异性肌球蛋白重链骨形态蛋白碱基对心肌轻链蛋白基因地高辛二硫苏醇糖二甲亚砜关键区段乙二胺四乙酸纤维生长因子绿色荧光蛋白受精后小时异丙基硫代一肴樘擒肌分隔同源盒家族吗啡啉神经嵴细胞心房利钠肽因子磷酸缓冲盐溶液聚合酶链式反应一苯硫脲实时定量视黄酸视黄酸受体视黄醛脱氢酶咽弓结合激活基因..疉—盇
确十二烷基磺酸钠标准柠橡酸缓冲液三羟甲基氨基甲烷末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记心室血管内皮细胞生长因子心室特异性肌球蛋白重链心室收缩指数や氯一吲哚一一半乳糖苷一ぁ猤
导师签名:丝叠鱼竺日期:~兰::之蒸堕墨日期:型迹篖~蛹⒘论文独创性声明论文使用授权声明本论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意。本人完全了解复旦大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。作者签名:
基因影响斑马鱼心脏发育机制的研究中文摘要:综合征是人类最常见的染色体缺失类型的先天性遗传病。综合征患者具有一些典型的临床特征,如先天性心脏病、中至重度的免疫功能缺陷、低钙血症、头面部的发育畸形等。许多研究表明上的一段约范围的微小的杂合性缺失是这些疾病的病因,这一区段被命名为关键区段人们应用小鼠的研究表明,单倍体缺失常伴有第四咽弓动脉双侧或单侧发育不良,而纯合子缺失将更加严重的阻断咽弓动脉系统的发育,表现综合征的典型特征。小鼠过表达也同样会导致一系列如异位锁骨下动脉,法勒氏四联征,肺动脉闭锁等异常。这些结果证实了基因可能是综合征最重要的侯选基因。许多神经嵴细胞来源的结构,如头面部的骨骼,胸腺,甲状旁腺和心脏流出道在⑹笾芯鱿址⒂毕荨R虼耍颐峭撇釺蜃魑狣的重要候选基因,可能是在神经嵴细胞的发育中充当重要功能的基因。但是基因只在咽弓、心脏和耳囊表达,并不在神经嵴细胞中表达,对于基因影响神经嵴细胞发育的机制还不清楚。基因通过与其它的转录因子的相互作用,形成一个转录调控的网络,并通过这个网络调控心脏的发育过程。那么,是如何被调控的,它又与哪些转录因子有相互作用还不清楚。视黄酸,俏谹在生物体内的活性代谢产物,在脊椎动物咽弓发育的过程中发挥重要的作用。,促使人们提出这样的假设,在咽弓形成的过程中,视黄酸与之间是否有相互作用关系。与其它的转录因子如、等之间的相互作用机制,以及与其它蚣易成员之间的拮抗或协同的作用关系,也还不清楚。本研究将以作为研究的突破口,对其上游调控因子以及与其他转录因子的相互作用和和其下游的靶基因进行深入研究。利用模式生物研究基因功能是一种行之有效的方法。斑马鱼作为脊椎动物的模式生物,其各系统的发育与人类相应系统有许多共同特点,年,等提出应用吗啡啉修饰性的寡核苷酸可下调斑马鱼基因的表达,而.
且可以多基因同时下调,因此这一快速有效的基因敲除方法,成为应用斑马鱼进行基因功能研究的重要手段。斑马鱼的心脏类似于人胚胎时的心脏,分为心房和心室,二者之间有瓣膜。斑马鱼特别适合心脏发育的研究。这主要是因为:呗碛愕男难9芟低撤⒂过程与人类有许多共同点,与人类的心脏发育具有相似的基因调控途径。马鱼胚胎体外受精,体外发育,完全透明,其心脏发育可以直接用眼睛观察,因此具有高度的可视性。呗碛愕呐咛タ梢圆灰览涤谟泄δ艿男难9芟低常甚至在整个心血管循环缺失的情况下,它都仍然能通过对氧的被动运输而生存,继续正常发育一段时间,这就为心血管系统严重缺陷的细节观察提供了可能。与鼠类模型相比,斑马鱼的主要优势是它提供了将经典遗传学与胚胎观察和操作结合起来研究的机会。斑马鱼的这些优势,使得对斑马鱼的研究异军突起,成为近几年使用最多的进行心脏发育生物学研究的模式动物,极大地推动了心血管疾病发病机制的研究。先天性心脏病是最常见的先天性遗传病,约以上的先天性心脏病患者均合并流出道畸形。许多综合征患者只表现出心脏流出道畸形,不伴有综合征的其它典型特征。因此,可以说综合征与一些孤立型的先天性心脏病有相同的遗传学和分子机制,探讨综合征的发病机制的意义可能远远大于蘅综合征本身。在流出道的发育中发挥重要作用这一事实已经逐渐明朗,我们将进一步研究