文档介绍：丙型肝炎病毒感染自然转归分子机制研究课题来源:学位申请人师答辩委员会主席免疫学侯金林教授李明研究员论文评阅人郭霄峰教授卫教授月专名称指导教答辩委员会成员李婷婷黎诚耀教授江丽芳教授廖明教授刘叔文教授李红卫教授赵广州业南方医科大学级博士学位论文国家自然科学基金;科技部苹钅;国家“;校创新团队项目。/
丙型肝炎病毒感染自然转归分子机制研究博士研究生:李婷婷指导教师:黎诚耀摘要丙型肝炎是由丙型肝炎病毒琀腥径鸬难现赝胁人类健康的传染病。尽管国际上在慢性丙肝防治理论与方法上取得了长足进展,但对⑸⒄沟姆肿踊屏私獾貌⒉煌赋梗乇鹗钦攵灾泄巳旱腥咀匀豢蹈吹姆肿踊迫圆磺宄A硪环矫妫狈硐氲腍感染动物模型,特别是小型灵长类动物感染模型,从机制与技术上阻碍了呙缑庖与抗病毒药物研究。本课题第一部分针对中国献血者人群腥咀匀豢蹈吹姆肿踊普庖豢学问题开展了研究。腥究煞治W匀豢蹈葱愿腥菊吆吐愿腥菊吡礁鋈巳骸腥咀9榧捌淞俅脖硐钟胨拗骱筒《镜淖匀皇粜砸约跋嗷プ饔糜泄亍D壳认为,宿主方面发挥作用的因素可能包括免疫应答和遗传因素,病毒方面的因素包括遗传异质性、病毒载量及病毒基因型等。因此,从宿主和病毒两方面来了解匀豢蹈春吐愿腥菊呶实牟畋穑杂诮沂綡术自然康复及慢性感染转归的分子机制,最终控制腥揪哂兄匾V傅家庖濉在这部分内容中,我们对来源于我国广东和北京地区献血者中的腥者进行研究,测定腥镜淖匀豢蹈幢嚷视牖蛐头植迹剿鱄自然康复及慢性感染的分子机制。对广东和北京献血者中固宄跎秆粜缘难G逖品采用两种椒ń锌固逶俨舛ǎ远縋方法测定病毒载量,并采用巢式院怂峤腥啡希痉治H諬感染状态,即自然康复性疉⒙/和假阳性疉2捎肊方法测定血清样品中趾虸吖含量。粜匝吠ü治蛄
中,《驹亓砍氏灾喙卿.。各基因型献血者中型抗,洗嬖谙灾钜欤匀豢蹈醋槟炅涞闹形皇岁吖含量..。在慢性感染人群感染病毒载量的控制上发挥作用。槐戎翟诼愿腥局杏氩《.。结论:通过比较中国北进行基因分型。结果,莩跎窰抗体阳性的样品中,自然康复性样品份、慢性感染份、假阳性份,匀豢蹈绰试嘉%。份量粜匝凡《驹亓糠段Т/到/形恢./“菘苫蚍中偷难钒%基因汀%基因汀甇%基因秃%基因汀型为主要基因型,椭饕7植荚诠愣分小通过对自然康复性、慢性、假阳性献血者的临床信息员稹⒛炅、体水平、血清中坑際基因型进行分析发现,三组腥咀刺于慢性感染和假阳性组,產含量的中位数略高于其它两组然统计学差异不显著,多重比较愿腥咀镮吖含量及固水平/、慢性、假阳性腥疚实囊幌低巢问现產应答可能在腥咀匀豢蹈粗衅鹬饕W饔茫鳬—蛟贖慢性关,它可能作为一个新的测定指标用于评价腥镜脑镀诮峁本课题第二部分针对腥旧形蘩硐氲男⌒土槌だ喽锬P驼庖豢蒲题,建立锔腥灸P吞剿鱄感染自然转归的分子机制。《荆艋撇《究聘尾《臼簟S際不同,瓸可以感染狨猴珻并导致急或慢性肝炎,因此是一个有价值的模拟腥镜奶娲《尽5荊—然与嬖谧挪钜欤荒芡耆D獗透窝撞《驹谔迥诘母腥居朊庖咦刺中文摘要
因此,以瓸基因组为骨架,以来源于献血者人群中一例基因型样本的δ苄曰蛉〈℉/瓸嵌合病毒的狨猴感染模型,探索含暾δ艿鞍椎那逗喜《靖腥咀匀蛔9榛疲为庖叻乐朴肟共《疽┪镅芯刻峁┯行笛槎锔腥灸P图际跗教ā在这部分内容中,我们以耐暾峁沟鞍谆⑼暾囊膜蛋白基因或主要非结构蛋白基因替换瓸相应基因构建了三种嵌合病毒瓹/瓸、瓻疓./瓸,通过肝内注射嵌合病毒蚓猜鲎⑸浜逗喜毒的原代狨猴血清,《踞鹾锔腥灸P汀=又植《,每周股静脉采血,采用定量⒊彩絇鉴定嵌合病毒在狨猴体内复制状况,同时测定血清中抗体反应性、產、购的变化,采用旧ü鄄旄卧嘧橹±硌П浠=峁文谧⑸淞巳智逗病毒及瓸阳性对照尼鹾锞鱿至瞬《靖粗频那榭觯《靖粗浦芷主要集中在三个阶段,接种病毒后周、芎堋苤蟛《驹量明显降低,周之后一直到周,病毒被清除或无法检测到。用含有嵌合病毒、瓸的狨猴血清分别静脉接种给其它正常狨猴后,狨猴均出现了传代病毒复制的情况,病毒复制集中在两个阶段,接种血清后周和一周,后一阶段病毒载量明显降低,随后病毒会被自然清除,直到周再次检测到病毒。第周时,/ù腥踞鹾和传代感染狨猴G逯屑觳獾讲《荆皇遣《驹亓拷系汀S朐啾龋ù《靖菀被清除。原代及传代嵌合病毒感染狨猴血清中剿孀挪《镜母粗朴兴高。另外,从组织病理学角度来看,原代及传代嵌合病毒感染狨猴的肝组织均出现淋巴细胞浸润、毛玻璃样变赴住⒑似啤杏锌帕W次镏、胆汁淤积、排列紊乱、水肿等典型病毒性肝炎的组织病理学变化。通过血清中嵌合病毒的检测