文档介绍：附件医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则一、临床基因扩增检验实验室的设计(一)临床基因扩增检验实验室区域设计原则。原则上临床基因扩增检验实验室应当设置以下区域:试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。这4个区域在物理空间上必须是完全相互独立的,各区域无论是在空间上还是在使用中,应当始终处于完全的分隔状态,不能有空气的直接相通。根据使用仪器的功能,区域可适当合并。例如使用实时荧光PCR仪,扩增区、扩增产物分析区可合并;采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪,则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。各区的功能是::贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的准备,以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。:核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管。对于涉及临床样本的操作,应符合生物安全二级实验室防护设备、个人防护和操作规的要求。:cDNA合成、DNA扩增及检测。:扩增片段的进一步分析测定,如杂交、酶切电泳、变性高效液相分析、测序等。(二)临床基因扩增检验实验室的空气流向。临床基因扩增检验实验室的空气流向可按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区进行,防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。可按照从试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区方向空气压力递减的方式进行。可通过安装排风扇、负压排风装置或其他可行的方式实现。(三)工作区域仪器设备配置标准。。(1)2~8℃和-20℃以下冰箱。(2)混匀器。(3)微量加样器(-1000µl)。(4)可移动紫外灯(近工作台面)。(5)消耗品:一次性手套、耐高压处理的离心管和加样器吸头。(6)专用工作服和工作鞋(套)。(7)专用办公用品。。(1)2-8℃冰箱、-20℃或-80℃冰箱。(2)高速离心机。(3)混匀器。(4)水浴箱或加热模块。(5)微量加样器(-1000µl)。(6)可移动紫外灯(近工作台面)。(7)生物安全柜。(8)消耗品:一次性手套、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤芯)。(9)专用工作服和工作鞋(套)。(10)专用办公用品。(11)如需处理大分子DNA,应当具有超声波水浴仪。。(1)核酸扩增仪。(2)微量加样器(-1000µl),(视情况定)。(3)可移动紫外灯(近工作台面)。(4)消耗品:一次性手套、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤芯)。(5)专用工作服和工作鞋。(6)专用办公用品。。视检验方法不同而定,基本配置如下:(1)微量加样器(-1000µl)。(2)可移动紫外灯(近工作台面)。(3)消耗品:一次性手套、加样器吸头(带滤芯)。(4)专用工作服和工作鞋。(5)专用办公用品。上述各区域仪器设备配备为基本配备,实验室应当根据自己使用的扩增检测技术或试剂的特点,对仪器设备进行必要的增减。二、临床基因扩增检验实验室工作基本原则(一)进入各工作区域应当严格按照单一方向进行,即试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区。(二)各工作区域必须有明确的标记,不同工作区域的设备、物品不得混用。(三)不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色)。工作人员离开各工作区