文档介绍：广州医学院
硕士学位论文
免疫性血小板减少症 T 细胞亚群及 T 细胞受体的研究
姓名:张小冬
申请学位级别:硕士
专业:内科学
指导教师:
20070510
中英文缩写对照
ITP Imunne Thrombocytopenia 免疫性血小板减少症
TCR T Cell Receptor
rpm Ration Per Minute
FCM Flow Cytometry
RT-PCR Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction 逆转录-聚合酶链反
应
plementarity Determining Region 3 互补决定区 3
IL Interleukin 白细胞介素
IFN-γ Interferon-gamma γ干扰素
TNF 肿瘤坏死因子
MNC Mononuclear Cell 单个核细胞
CTL(Tc) 细胞毒性 T 细胞
Th 辅助 T 细胞
EDTA 乙二酸四乙胺
免疫性血小板减少症的 T 细胞调控机制的研究
学位申请人:张小冬
导师:
中文摘要
研究背景
免疫性血小板减少症(Immune Thrombocytopenia,ITP)是一种自身免疫性
疾病,患者的免疫功能低下,以往认为,其发病机制主要是 B 细胞介导的体液免
疫。但近年来越来越多的研究表明,T 细胞免疫机制异常在其发病和进展中有重
要作用。根据细胞是否表达 CD4 或 CD8 分子,T 细胞可分为 CD4+T 细胞和 CD8+ T
细胞,它们各自分化的效应细胞不同,发挥不同的免疫效应。在正常情况下,
CD4+/CD8+比例恒定,以维持正常的细胞免疫机制。而 ITP 患者由于细胞免疫异常,
常出现 CD4+/CD8+比值失衡和功能紊乱。因此,分析 T 细胞亚群及所分化的效应
细胞所分泌的细胞因子,可以了解到 T 细胞的免疫功能状态。T 细胞(抗原)受
体(T Cell Receptor,TCR)是所有 T 细胞的特征性标志,其作用是识别抗原。根
据所含肽链的不同,TCR 可分为 TCRαβ和 TCRγδ两种类型,体内大多数 T 细
胞表达为 TCRαβ,称αβT 细胞。所有 T 细胞表面均表达 CD3 分子,TCR 则与
CD3 分子以非共价键结合,形成 TCR-CD3 复合物。近年来国内外均认为,利用基
因扫描(Genescan)技术检测 CDR3 长度差别以确定 T 细胞克隆性是目前较为理
想的检测 T 细胞克隆性增殖和同时了解 TCRVαβ各家族表达情况的方法,该法具
有敏感、精确、客观等特点。
为了了解 ITP 患者的 T 细胞免疫功能状态,探讨 T 细胞免疫异常在 ITP 的发
生、发展、预后的关系,本研究分析了 ITP 患者外周血 T 细胞亚群及其所分化的
效应细胞所分泌的细胞因子的的情况,以及 7 例 ITP 患者治疗前后外周血 TCRVα、
Vβ的表达和克隆特点。
研究内容与方法
应用流式细胞仪(Flow Cytometry ,FCM)法检测 ITP 患者及正常对照组外
周血 T 细胞亚群及其所分化的效应细胞所分泌的细胞因子的特点,用统计软件
SPSS 进行统计分析;用 RT-PCR-Genescan 技术分析 ITP 患者治疗前后以及正常对
照组 T 细胞受体的表达和克隆特点。
结果
1、ITP 患者免疫功能低下,存在 T 细胞的功能紊乱,本研究中的 33 例 ITP+
患者 CD4+T 细胞的百分比下降,CD8+T 细胞的比值上升,与正常对照组比较有统
计学差异,而 CD3+T 细胞以及 CD4+/CD8+细胞的比值无显著差异。77 例 ITP 患者
IFN-γ、IL-2 水平均较正常对照组上升,与正常对照组比较有统计学意义,两者
之间的比值无显著差异。
2、24例免疫性血小板减少症患者分别表达0-25个TCRVα亚家族、0-24个TCRVβ
亚家族。24例病人均存在1个或以上的Vα和、Vβ亚家族的克隆增殖T细胞,增殖
形式包括寡克隆、寡克隆增殖趋势及双克隆。其中7例ITP患者治疗后T细胞亚家
族的表达与克隆部分有所改善。
结论
1、免疫性血小板减少症患者免疫功能紊乱,出现T细胞免疫功能缺陷,T细
胞亚群及其所分化的效应细胞所分泌的细胞因子发生变化。
2、免疫性血小板减少症患者的T细胞亚家族存在倾斜性分布和克隆性增殖,
部分患者治疗后这一情况可改善,提示ITP患者亚家族的这一特点与ITP的T细胞调
节的发病机制有关,相关治疗方法可以部分纠正。
关键词
免疫性血小板减