文档介绍：中山大学
博士学位论文
通过CD123分子靶向白血病干细胞治疗急性髓性白血病的病毒-
基因治疗策略及研究
姓名:谭丽
申请学位级别:博士
专业:肿瘤学
指导教师:黄文林
20090526
通过肿影邢虬籽2「:肿瘤学指导教师:黄文林教授博士生:谭丽急性髓系白血病鞘フ6ㄏ蚍只δ艿非成熟的白血病细胞在体内堆积而产生异常造血的一种克隆性疾病,在我国是最常见的恶性血液病。磕甑姆⒉÷⒉⑾至诵矶嘈碌陌籽2≈瘟品桨讣耙┪铮ň蠖数的患者仍会死于这种疾病。目前认为在白血病患者体内存在一群白血病干细胞,,由于处于静止期,使目前的化学药物治疗只能杀灭晚期白血病细胞,但足残留的会继续无限增殖,分化产生白血病母细胞群,导致颊咴谥瘟拼锏酵耆ɑ航夂笸够岣捶ⅰR虼宋A私饩霭籽2≈瘟后早期复发的问题,提高患者长期生存率,只有针对的靶向治疗才是最有效、最根本的治疗策略。有人认为,悄壳胺⑾值淖罹哂锌7⑶绷Φ奶卣餍钥乖弧3タ隆抗体外,已有研究应用细胞因子与细胞毒药物融合的方法来治疗U庵址法能对白血病祖细胞和翰拘宰饔茫哉G疤逑赴薅拘浴表面抗原的识别和靶向治疗,是一个很有价值的研究方向。慈薎受体是一个异二聚体结构,其腔涮褰岷现凉刂匾#普通腔咔缀土ε涮褰岷嫌泄兀⒔榈夹藕抛5肌S斜ǖ老允荆毙运柘白血病患者的疌赴弑泶颕受体鳫槐泶锘弱表达。疌赴侨罕恢踩氲椒欠逝中吞悄虿。刂⒘:厦庖呷毕菪/筇迥冢捎辗⑿∈驛的发生,蝗衔J荓的一个非常重要的靶,提示勺魑O赴疽┪镒饔玫陌械恪R虼艘訡为靶进行小山大学博貉宦畚谭丽
,,不仅可以清除一共换岫栽煅S谙赴,造成损伤,是瘟频挠行Х桨浮白血病的基因靶向治疗是一种值得探索的方案。有效的基因治疗依赖于外源基因高效、稳定的表达,病毒载体介导的基因转移以其高转染效率和良好的靶向性而成为基因治疗中应用最广泛的技术手段。基因治疗涉及靶基因、靶基因载体和靶基因的表达调控。在本课题的研究中我痌用肿幼魑0校擞梅肿生物学的技术和手段对病毒载体进行修饰或加工使其能够充分地靶向白血病母细胞群及白血病干细胞,以期达到治疗白血病的目的。本研究分三部分:谢虻难≡首先我们通过体外的细胞实验确定了对细胞有明显毒性作用的靶基因即长臂猿白血病病毒的融合基因包膜糖蛋白—,研究结果显示—,形成多核合胞体,融合指数在转染后的镏±%,⑸邓佬运劳觯琍旧ǚ⑾炙劳龅亩嗪合胞体在第齑锏阶芎习宓脑ィ樗嵬亚饷傅幕钚栽谕氖奔淅镆达到了约%。说明多核合胞体的不断形成导致了细胞死亡的不断发牛。我们通过/⑸劳龅幕朴際的表达增加有关,我们的研究发现—谋泶锊唤隹梢杂盏糎的表达增高,。=凶匝2』蛑瘟频靶基因。⒅刈樾恋卤纤共《驹靥宓墓菇ḿ把芯包膜糖蛋白含有表面单位和转膜元件二个部分。肿瘤基因治疗的一个很重要的目标就是发现新的靶向性的细胞毒基因。【
是白血病干细胞上最有显著特异性的标记,⒂肫浣腥诤弦栽銮縂瓼的靶向性。但是对于肿瘤的治疗来说,㈦斐晌R桓鲋瘟苹所存在的困难就是难以产生高滴度的病毒用作基因转移的载体。《驹靥逶贐细胞中被包装时可产生高滴度的病毒,#±%,..,而对细胞基本没有影响钕赴饰#±%《究拱籽2〉男вΓ⒕哂泄セ靼籽2干细胞的潜力。⑾俨《局匕邢虬籽2「上赴难芯鉴于目前最常用的基因转染载体还是腺病毒,因此我们对如何优化腺病毒用于白血病的基因治疗也进行了一定的探索。以肿幼魑0校ü肿生物学技术构建并表达接合分子的策略,使有生物学活性的接合分子在与腺病毒结合后使其特异性地靶向细胞表面的肿樱佣榈疾《径园血病母细胞群及干细胞的转染。《静剐缘奈侍猓黾恿讼俨《靖腥镜姆段Ш吞匾煨裕可以使腺病毒具有专一的靶向性。∠赴转染率为:.%和单独的腺病毒转染H韭饰#.相比有显著差异。体外体内实验也证明了和单独的相比寺“俜直确直鹞.%,,《揪哂凶H景籽2