crispr-cas9基因敲除小鼠.ppt

文档介绍：CRISPR--Cas9系统的原理crRNA(CRISPR-derivedRNA)通过碱基配对与tracrRNA(trans-activatingRNA)结合形成tracrRNA/crRNA复合物,此复合物引导核酸酶Cas9蛋白在与crRNA配对的序列靶位点剪切双链DNA。而通过人工设计这两种RNA,可以改造形成具有引导作用的sgRNA(shortguideRNA),足以引导Cas9对DNA的定点切割。-Cas9系统的原理sgRNAtarget通过设计sgRNA来确定剪切位点设计简单快速,,Cas9往往只用与细胞或胚胎层面的实验。本实验采用Cre-dependentRosa26Cas9knockinmouse克服了这个局限性。使得CRISPR-Cas9应用更广泛。-dependentCas9Rosa26targeting矢量图荧光蛋白Rosa26,:三种转接方法:纳米粒子、腺病毒转导、慢病毒转导。三个系统(器官):免疫、神经、肺(癌)。、慢病毒转入树突状细胞——.