文档介绍：重庆大学
硕士学位论文
β-甘露聚糖酶产生菌的筛选及基因的克隆与表达研究
姓名:包凌霞
申请学位级别:硕士
专业:植物学
指导教师:黄俊丽
20090604
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摘要半纤维素是一类可再生能源物质,其总量占植物干重/龃斡谙宋兀枯草芽孢杆菌以糖酶基因序列的特点设计特异性引物,成功的扩增出该基因的全长序列。将事关键词:甘露聚糖酶,分离,鉴定,酶活性,原核表达其分解利用对于解决未来能源危机与环境问题意义重大。对半纤维素分解过程中酶促反应的研究以及酶的筛选一直是研究热点。本研究以采集的土壤样品为实验材料,经过富集培养及分离纯化,筛选出两株产事毒厶敲傅木辍2捎靡∑培养分别测定其酶活力,其中二号株菌株酶活力较高,酶活力达是一号菌株的丁>?莶菅挎吒司对这两株产酶菌株的最适条件研究发现:假单胞菌以玉米粉,魔芋粉,,℃为最优产酶条件,,作用的最适为,最适反应温度为℃;稳定性较好,在~甇较稳定。该酶的作用温度范围较宽,在℃~℃酶活力保持稳定。酵母粉,魔芋粉,,℃为最优产酶条件,,已达到同类酶中的较高水平。该枯草芽孢杆菌产酶时间短,发酵培养汛锊父叻澹绕渌<株的产酶周期明显缩短。℃;稳定性好,稳定范围较宽,在甇~酶活力变化不大;该酶作用的温度范围宽,在℃婷富盍Ρ3治榷ǎ泻芨叩墓ひ道价值。本研究根据已分离的甘露聚糖酶基因特点,结合己发表的枯草杆菌事毒聚糖酶基因寺〉皆吮泶镌靥錺.,,最佳诱导时间为>甈检测,发现重组菌能正确表达约娜诤系鞍住S肈法检测不到重组菌粗酶液酶活性,重组蛋白经可溶性分析表明该蛋白主要以包涵体形式存在。重庆入学硕十学位论文中文摘要痬/
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、米曲翱.、木绪论引言国内外研究进展事毒厶敲咐丛傲膄厶俗【】、假单胞斟⒙研文飧司鶥⑷认怂缶鶦葡聚糖主链啾龋胂宋亟峁褂胱槌墒指丛樱揪厶恰⒏事毒厶恰⒗这两种多糖与纺织、食品、饲料及制浆造纸工业关系最大【俊及应用等的研究成果是近期才陆续被报道。对微生物来源的事毒厶敲冈缙诘难~、地衣芽袍杆菌卧】、枯草芽袍杆菌勋嗷恕、解淀粉芽袍杆菌【】、短小芽袍杆菌舰研【⑾宋グ鬋⒄婢械恼婢胝『司植物是自然界主要的可再生有机资源,主要成分是纤维素、半纤维素和木质素。半纤维素占植物干重的%,在自然界中含量仅次于纤维素。与纤维素..伯聚糖、阿拉伯半乳聚糖和木葡聚糖等多种组分,而其中又以木聚搪和事毒厶,事毒厶敲,瓺,.,简称事毒厶敲福是一类能水解含有,⑵细事毒糖和半乳甘露聚糖等陌胂宋孛咐啵惴捍嬖谟诙参锖臀⑸镏小7纸飧事聚糖的酶的最初报道是在世纪初,但有关事毒厶敲傅奈⑸锖铣伞⒚秆灾究工作主要集中在产酶菌株的选育,酶的分离纯化和理化性质,酶水解作用的机理及诱变等方面。.事毒厶敲腹惴捍嬖谟谧匀唤缰校诙铩⒅参锖臀⑸镏卸挤⑾指妹傅拇在。但目前商业化