文档介绍：精品文档JM109,DH5aBL21这些感受态有何区别1:DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。 ,可与载体编码的半乳糖苷酶氨基端实现 a-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。基因型:F-,$80dlacZAM154lacZYA-argF)U169,deoR,recAI,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,k,thi-1,gyrA96,relA12:BL21(DE3)菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7启动子的表达载体(如 pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于入噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。|基因型:F-,ompT,hsdS(rBB-mB—),gal,dcm(DE33:BL21(DE3)pLysS菌株该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平, 但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。基因型:F-,ompThsdS(rBB-mB—),gal,dcm(DE3pLysS,Camr4:JM109菌株性,由此很容易鉴别重组体菌株基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi—1,hsdR17,supE44,relA1,A(lac—proAB)/F'5:TOP10菌株DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZAM15进行a-互补,从而显示 半乳糖苷酶活该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13phage载体进行转染时,由于载体该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。基因型:F-,mcrAA(mrr-hsdRMS-mcrBC), $80,lacZAM15,△lacX74,recA1,araA139A(ara-leu)7697 ,galU,galK,rps,(Strr)endA1,nupG6:HB101菌株该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验基因型:supE44,hsdS20(rB-mB—),recA13,ara—14,proA2,lacY1,galK2,rpsL20,xyl-5,mtl-1,leuB6,thi-1M110或SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶,前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基,A/TGC序列的第一个胞嘧啶C-5位置上引入甲基。常用的菌株都会产生dam,dcm, DNA不能切割,如FbaI和Mbol等,一般生物公司提供的内切酶说明中均有说明。大多数酶切位点的甲基化不影响切割,而有些会影响,如 XbaI,BclI等。而且甲基化只发生在特定序列,以XbaI为例,只有在位点序列旁出现GA或TC,该XbaI位才会被甲基化。而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法:选用上述酶的同功酶, 如Sau3AI,DNA识别切割位点与Mbol相同;但不受甲基化影响;利用甲基化酶缺失的受体细胞进行 DNA的制备,,前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出,而后者细胞内本就没有甲基化酶,从这些细胞中抽提的 DNA就能被上述酶切割。