文档介绍：实验一大鼠在体肠循环吸收实验[ 实验目的] 1. 掌握大鼠在体肠循环吸收的实验方法; 2. 掌握药物肠吸收的机理; 3. 掌握计算吸收速度常数( ka )和吸收半衰期( t1/2 )的方法; [ 实验原理] 被动扩散是消化吸收的最重要途径, 它是药物分子通过胃肠屏障从浓度高的区域( 吸收部位) 向浓度转低的区域( 血液) 扩散, 电动势高的向电动势低的区域移动, 不消耗生物体的能量,只与浓度有关。其扩散速率与膜两侧的浓度差成正比, Fick 方程式定量的描述了这一过程: 式中 dQ/dt 为分子型药物的渗过速度;S 为膜的面积;D 为膜内的扩散速率常数; Ko为油/ 水分配系数, C 为消化液中药物浓度; Cb 在血液中药物浓度; h 为膜的厚度。 P=D Ko 为透过常数。一般药物进入循环系统后, 立即转运至全身, 故药物在吸收部为循环液中的浓度相当低, 可忽略不计。因此透过速度与消化液浓度成正比。若设 PS/h=ka 式则可以简化为: 由上式可看出药物的渗过速度属于表观一级速度过程。若以消化液药物量的变化 dx/d t 表示透过速度,则: 经积分和对数变化后得: 以时间 t 对小肠内残存的 LnX 作图应为一直线, 其直线斜率即为药物在小肠中的吸收速度常数 ka. 。在研究药物的肠吸收机制时, 由于小肠不仅吸收药物也吸收水分, 使灌流液的体积减小, 故不能用直接计算药物浓度的方法来计算剩余药量。目前, 国内常用校正水分的方法主要有重量法和酚红法。本实验采用酚红法。[ 仪器] 蠕动泵、分光光度计、红外灯[ 材料] 大鼠、大黄、 70% 乙醇、酚红、氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化镁、碳酸氢钠、磷酸二氢钾、葡萄糖、乌拉坦、乙醚、 N,N- 二甲基甲酰胺、芦荟大黄素对照品,大黄酸对照品,大黄素对照品,大黄素甲醚对照品及大黄酚对照品等。[ 实验内容] 1. 试液的配制(1) mol/L 氢氧化钠( NaOH )溶液:称取氢氧化钠 g置 100 ml 量瓶中,加蒸馏水定容,摇匀备用。(2 )生理盐水:称取氯化钠 g置 100 ml 量瓶中,加蒸馏水定容,摇匀备用。(3) Krebs-Ringer 试剂( K-R 液, ): 称取氯化钠 g, 氯化钾 g, 氯化钙 g ,碳酸氢钠 g ,磷酸二氢钠 g ,氯化镁 g ,葡萄糖 g ,加蒸馏水溶解使成 1000ml 。(4) 20% 乌拉坦溶液:称取乌拉坦 20g置 100 ml 量瓶中,加蒸馏水定容,摇匀备用。(5 )供试液:将大黄饮片粉碎成粗粉, 称取 40g 药粉置于圆底烧瓶中, 加入 320mL 体积分数为 70% 乙醇回流提取 3次, 每次 h 。将 3 次回流提取液合并, 过滤, 减压回收至无醇味。将回收后溶液溶于 Krebs-Ringer 试剂( K-R 液, ) ,作为进入大鼠肠内的供试液。(6 )酚红溶液:精密称取酚红 20 mg置 1000 ml 量瓶中,加 Krebs-Ringer 试剂定容,摇匀备用。 2. 装置大鼠在体肠循环吸收实验装置图( 1. 温度计 2. 恒温水浴 3. 药液 4. 蠕动泵 5. 大鼠小肠) 3、色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂, 以甲醇-0