文档介绍:花果山银杏叶中黄酮化合物的提取与测定
(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)
作者:胡喜兰程青芳尹福军李静
【摘要】目的为适时采收,合理开发利用银杏叶,了解连云港地区银杏叶中主要黄酮含量与摘收季节的关系。方法通过常规的实验方法,水解提取银杏叶中的黄酮,利用HPLC法测定3种不同树龄的银杏叶在春秋两季中主要黄酮化合物含量,同时利用DPPH·法测定其抗氧化活性并加以比较。结果发现不同树龄的银杏叶黄酮含量差异较大,不同生长季节含量存在着差异,春季含量高于秋季;银杏叶提取物的抗氧化活性与黄酮含量基本成正比关系。结论春季采收银杏叶有利于黄酮化合物的开发利用。
【关键词】银杏叶; 黄酮; 提取; 测定
银杏叶是银杏科银杏属植物Ginkgo biloba 。我,归心、肺经。本草纲目中记载银杏具有“敛肺平喘,止遗尿、白带”的功效[1~3]。可用于治疗肺虚咳喘、冠心病、心绞痛、高血脂等症[4,5]。其药用价值日益引起国际医药、化学和植物学界的重视,开始了对银杏叶的综合开发利用和研究。为适时采收合理开发利用银杏叶,了解连云港地区银杏叶中主要黄酮含量与摘收季节的关系,本文通过常规的实验方法,水解提取银杏叶中的黄酮,探索HPLC法的最佳色谱条件,测定3种不同树龄的银杏叶在春秋两季中主要黄酮化合物含量,为进一步研究提供依据。
1 仪器与材料
紫外分光光度仪:日本岛津公司;B-220型恒温水浴锅:浙江舟山市定海区海源仪器厂;KS-150D型超声波清洗器:宁波科生仪器厂;SHZ-CD 型循环水式多用真空泵:浙江舟山市定海区海源仪器厂;WFZ-2000型紫外可见分光光度计:尼龙柯仪器有限公司;Shimadzu LC-l0A型高效液相色谱仪:日本岛津公司;BS210S 型电子天平(MAX=210g d=):北京塞多利斯天平有限公司;DHG-9240A型电热恒温鼓风干燥箱:上海一恒科技有限公司;XA-1 型固体粉碎机:金坛市科兴仪器厂;SK-1快速混匀器:常州国华电器有限公司。
样品1: 4月下旬采于淮海工学院多年生银杏树;样品2: 4月下旬采于花果山九龙桥百年银杏树;样品3: 4月下旬采于连云港花果山三元宫千年银杏树;样品4:头年10月下旬采于淮海工学院多年生银杏树;样品5:头年10月下旬采于连云港花果山九龙桥百年银杏树;样品6:头年10月下旬采于连云港花果山三元宫千年银杏树。6种样品叶均于55℃恒温干燥后,粉碎过筛,置于磨口瓶中,密闭避光保存。
槲皮素、山萘酚标准品(中国药品生物制品鉴定所出品)异鼠李素标准品(Biochemika公司),DPPH·(1,1-二苯-2-苦肼基 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl ,Sigma 公司),甲醇(色谱纯,国药集团化学试剂有限公司出品)。甲醇、盐酸、磷酸、醋酸等均为分析纯试剂,水为去离子水(自制)。
2 方法
黄酮标准品溶液的制备
mg的山萘酚,加甲醇溶解, ml容量瓶中备用。
mg的槲皮素,加甲醇溶解, m