文档介绍：东北农业大学
硕士学位论文
酪蛋白ACE抑制肽的类蛋白反应修饰与溶剂分级研究
姓名:孙辉
申请学位级别:硕士
专业:食品科学与工程;食品科学
指导教师:赵新淮
2012-06-10
,产生根似的结果。无脯氨酸存在下修饰以往研究表明,酪蛋白是生物活性肽的重要来源。本研究以酪蛋白水解物为底物,分别在有无脯氨酸存在下进行类蛋白反应,改变酪蛋白水解物的种苹钚裕煌苯腥芗练级处理,并对高活性肽组分进行体外酶抗性分析和电泳分析。利用碱性蛋白酶水解酪蛋白制各酪蛋白水解物而后对其进行碱性蛋白酶催化类蛋白反应修饰。水解时间为乃馕锏腁抑制活性最高,/。利用中心组合设计和响应面分析法优化修饰反应条件,固定反应时间,以反应体系中游离氨基减少量为响应值,得到的最适反应条件为:酶添加量/鞍字省⒎从ξ度℃、酪蛋白水解物的浓度%/,此条件下反应体系中游离氨基减少量达到/,并测定不同修饰程度修饰产物的种苹钚院透霰鸩锏腎怠酪蛋白水解物的种苹钚跃嫘奘纬潭鹊脑黾佣岣撸翰⑶,相应修饰产物的值可降至./;,、、,同时对修饰产物进行水分级做对照,分级得到上清液和沉淀两部分分级产物,测定它们的回收率、游离氨基含量和种坡始案霰鸩锏腎怠@业鞍姿馕:./鞍字剩琁悼山至./,水分级的沉淀部分游离氨基含量为./鞍字剩琁悼山抵痬挥懈彼岽嬖谙滦奘尾锏:,/,,值可降至./。所以,低极性溶剂可以用于分离高活性肽组分。碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶对酪蛋白修饰产物及其分级产物进一步酶水解和蠡钚跃邢陆怠3钚缘鞍酌竿猓煌锒砸鹊鞍酌浮⑽傅鞍酌浮木瓜蛋白酶的抗拒能力相对较强,在反应体系浓度为/的条件下种苹钚栽ィ哂诶业鞍姿馕.。酶抗性分析结果表明四种酶均能破坏其原有活性,碱性蛋白酶对疏水性氨基酸有高度的专一性,对肽中的疏水肽段优先作用导致活性降低明显。,表明有新的肽段生成。这些新生成的肽段可能是修饰产物和分级产物种苹钚蕴岣叩闹饕T颉关键词酪蛋白水解物;类蛋白反应:溶剂分级;种苹钚裕幻缚剐詈皇曼鼍苎鼍詈曼皇皇皇苎竺曼菏罨事詈苎皇詈苎量鼍皇曼曼皇曼苎詈皇曼暑夯詈鼍詈鼍詈适铞绢菏铞韭痬
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