文档介绍：中国海洋大学
硕士学位论文
噬菌体聚糖酶及其酶解产物的化学及生物学研究初探
姓名:乔来艳
申请学位级别:硕士
专业:食品科学
指导教师:牟海津
20090601
噬菌体聚糖酶及其酶解产物的化学及生物学研究初探摘要细菌胞外多糖是用来研究和制备新型生物寡糖的良好来源,现已发现微生物胞外多糖通常是由双糖至八糖形成的规则的重复单位构成,而这些重复单位则是由种单糖所组成,其中许多糖链上又携带有乙酰、丙酮酸、糖醛酸等特征基团。这些特点决定了胞外多糖组成和结构的多样化。借助于酶解技术,就为批量制备这些重复寡糖序列提供了可能性,从而开发出具有新型生理活性的寡糖因3龇⒕辏删寰厶敲肝9ぞ呙福谕芑竦具有新型生物活性的寡糖组分。由于胞外多糖产量的大小影响着酶解产物的批量生产。因此本文对影响该菌胞外多糖产量的培养基及培养条件进行了优化,由单因素试验和正交试验确定了该菌株发酵产糖的最佳培养基组成及发酵产糖的最佳条件。以发酵基础培养基为对照,优化条件下对幸禾迮嘌銭产量为/,结果表明该噬菌体形态近似圆形,大小约,核酸类型为单链怂岢度大于桓檬删宓氖删呶M该鞴嬖虻脑残危馕S捎谑删寰厶酶释放所形成的半透明环,效价为甇×/,对宿主细胞的裂解稳定性好,感染宿主菌那狈诩氨⑵诮隙獭对噬菌体置诘氖删寰厶敲附到獍舛嗵堑姆从μ跫辛擞呕结果表明反应温度为、胞外多糖浓度为ァ⒎从σ撼跏紁滴.⒎从时间为及酶液浓度为原液的妒备妹附到獍舛嗵堑幕盍ψ罡撸烟堑牡率约为%。在寡糖的生物活性研究方面,采用体外分析方法对获得的酶解产物进行益生元活性和抑菌作用的研究,并选择了其它几种寡糖作比较。结果表明,烟的值较高、产气量低、短链脂肪酸含量一般但种类较多,较适合作为益生元;对寡糖抑菌作用的分析表明,与的细菌数相比,寡糖对大肠杆菌的抑制作用及对乳酸菌的促生长作用很明显,对单增李斯特菌的子。本论文以
抑制作用不明显,对沙门氏菌的生长有一定的促进作用;对大肠杆菌、沙门氏菌的抑菌作用及对乳酸菌的促生长作用,寡糖庞谄咸烟恰D壳吧忻挥泄于此寡糖相关活性方面的报道,通过该研究丰富了当前寡糖的应用前景。在寡糖结构分析方面,以酶解产物为研究对象,经分离纯化制备出五、十、十五糖,借助于一级质谱确定了各片段的分子量大小。结合红外光谱,核磁共振图谱及气相色谱等初步确定了寡糖的结构框架。试验表明利用噬茵体聚糖酶降解胞外多糖后得到的酶解产物易于分析、产物组成简单、结果重复性非常高,是我们研究细菌胞外多糖结构的一种理想的工具酶。关键词:慌嘌跫呕皇删寰厶敲福簧锘钚裕还烟墙峁分析
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卉车划学位论文作者签名:·南禾孝钆签字日期:砷年多月签字日期:矽暾荚耮日学位论文版权使用授权书独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得≥或其他教育机构的学位或证书使本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎适用本授权书用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:学位论文作者毕业后去向:工作单位:电话:通讯地址:邮编:
细菌胞外多糖的分类虺芇貌糠钟胂赴に缮⒔岷仙踔粮静唤细菌胞外多糖的合成微生物多糖主要是指大部分细菌、少量真菌和藻类产生的多糖。微生物多糖因其安全性高、副作用小、理化特性独特等优点使其在食品、化工等领域备受关注,尤其在医药领域具有巨大的应用潜力。细菌多糖作为微生物多糖中的一种,由于可在较短时间内可以合成大量的胞外多糖,且具有较简单的重复结构,为研究多糖的结构及生物活性提供了理想的模型,所以近年来备受青睐。利用酶法降解多糖制备小分子量寡糖的方法分析胞外多糖结构也是研究者较常用的方法之一。长期以来,人们就利用噬菌体聚糖酶为工具酶,结合红外光谱、甲基化等技术,对细菌胞外多糖的结构进行研究。如克雷伯氏菌,目前已经发现了多种侵染不同血清型克雷伯氏菌的噬菌体,利用这些噬菌体所分泌的酶对克雷伯氏菌的胞外多糖进行降解,进而分析糖链结构。此外,酶法制备的寡糖因其产品质量稳定、得率高、生物学活性多样,同时细菌胞外多糖容易收集和纯化,所以为未来研究和批量制备有效药物和食品功能因子提供了丰富的简称,是指广义