文档介绍：诟蜗赴┲械谋泶锛捌淞俅惨庖宓难芯课题来源:广东省基金专学位申请人教答辩委员会主席答辩委员会成员外科学蔚ㄍ饪廖彩仙教授杨定华教授梁力建教授阚和平副教授方学军副教授论文评阅人彭宝岗教授邹衍泰副教授月日南方医科大学级硕士学位论文业称指导师彭正奎广州名
肝细胞肝癌谋泶锛捌淞俅膊±硪义的研究硕士研究生:彭正奎指导教师:廖彩仙杨定华教授摘要背景与目的材料和方法肝细胞肝癌,是世界范围内发病率最高的恶性肿瘤之一,每年约有蛞陨系娜诵禄即瞬鞘澜缥郎橹ú嫉十大恶性肿瘤之一【俊K彩俏夜畛<叶裥猿潭茸罡叩闹琢鲋弧=年代以来,殉晌N夜诙话┲⑸笔帧根治切除术后旮捶⒙「伟┑母捶⒙嗜愿叽%阋约涓捶⒙手摺R虼颂剿鱄术后复发和转移倾向,对牟〕探埂⒏捶⒆R魄蹦堋⒃ず蠊兰频确矫嬗重要的价值。近年来,研究发现核基质结合区结合蛋白质琒胫琢龅姆⑸⒆R萍霸ず蟮扔幸欢ǖ墓叵怠】。本研究采用实时荧光定量⒚庖咦榛蚖方法,以患者手术切除的癌组织和癌旁组织为研究对象,旨在检测人肝细胞肝癌组织中和蛋白的表达情况,分析虮泶镉際的复发转移、临床病理参数及其术后生存时间的关系,从而进一步从分子生物学角度提高对娜鲜叮狧的临床诊断、治疗方案和评估预后提供新的线索。⒆橹瓯所有组织标本均取自南方医科大学南方医院肝胆外科年拢
①所有另取肝细胞腺瘤常肝组织一份,标本分两部分,一部分经4嬉捍砗螅姹4姹赣茫外一部分用来提取组织蛋白。笆凳庇ü舛縋检测肝细胞肝癌的表达引物设计合成喜檎夷康幕騧蛄校贑区设计特异性引物。设计引物所用软件名称:软件。序列如下::扩增片段长度一以D诓危镄蛄腥缦拢一及实时荧光定量提取肝癌组织及癌旁组织总螅心孀B挤从反应体系:环应条件:℃,从反应体系:反应条件:共个循环凳庇ü定量从反应体系:环从μ跫;℃;℃个循环计算表达值相对于泶镏档南喽员妒定量崾笙低匙远蒀担砻扛:瓵’:,Ⅱ
反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。为保证实验数据的可靠性,每个样本重复进行三次实验,计算各样本平均值和/,计算!,即为泶镏相对于泶镏档南喽员妒⒚庖咦榛觳飧蜗赴伟┲蠸蛋白的表达采用免疫组化二步法测肝细胞肝癌组织及其对应癌旁组织中鞍姿检测肝细胞肝癌鞍椎谋泶实验测定肝癌组织及其癌旁组织谋泶组织裂解法提取组织蛋白,ú舛ǖ鞍着ǘ龋蠾实验,结果用紫外线投射凝胶图像扫描仪进行图像分析,软件测定各条带的计算肝癌组织中鞍紫喽园┡员泶锏谋妒软件测定目的墓饷芏戎值澳诓蜧的光密度值,以/和直鸫砟康奶醮湍诓翁醮面积鞸蛋白的相对表达量。计算每例标本中癌组织与癌旁组织蛋白相对表达量的比值癌组织/┡宰橹,代表肝癌组织中鞍紫喽园┡员泶锏谋妒扑愎轿#篠瘫组自癞旁组】/【搿罶詘】。⒏蜗赴伟┲蠸的表达与临床资料的比较结合临床资料,分析肝细胞肝癌中及其蛋白的表达与患者临床病理资料、预后资料的关系。⑼ü舛量峁谋冉现校┳橹氚┡宰橹涞谋冉喜捎门涠詔检验,硕士学位论文平的表达。值。瓹/
表达与颊呤鹾蟾捶⒆R魄榭龅谋冉喜捎妹煅椋媲卟验;免疫组化结果的比较中,统计组间差别采用矛检验及四格表精白的表达较癌旁组织升高与否的率与临床病理参数之间的比较采用煅椤Q∪结果表达与颊呤鹾蟾捶⒆R拼嬖谙灾圆钜.,履诟捶俜致史直鹗ァ、、.%、、.%、病理参数之间的比较采用两样本煅椤⒎讲罘治觥检验,确概率法,相关性检验用相关分析。结果的比较中,肝癌组织与癌旁组织鞍妆泶锔叩偷谋冉喜捎门涠詔检验,鞍椎谋达与临床病理参数之间的比较采用煅椤—┳橹疭蛋检验水准┰鎏醮允靖伟┳橹筒糠职┡宰橹即嬖赟的表达,但癌组织的表达高于癌旁组织。⑹凳庇ü舛縋检测结果示癌组织表达量显著高于癌旁组织,。⑹凳庇ü舛縋结果与颊吡俅膊±碜柿系姆治龇⑾职┳橹蠸表达的高低与⒅琢龃笮┧ā⒉±矸只分级、术后复发转移有关系,有统计学差异;与性别、年龄、乙型肝炎表面抗原、肿瘤的数目、肝硬化、包膜无关,无统计学差异。显著高表达组、高表达组、低表达组术后鲈履冢履冢⒈咀例病例中,随访时间为鲈拢形凰娣檬奔月,随访率为ィ年累积生存率为.%,昀刍媛饰ァ=械ヒ素的预后分析,发现显著高表达组、高表达组、低表达组三组的昀刍媛史直鹞,.%和ィ年累计生存率分别为和ィ摘要
计学意义..琍.,癌组织的阳性率显著高于癌旁组织结论生存曲线经检验发现,型臣蒲б庖濉⒚庖咦榛峁允景┳橹桶┡宰橹疭的表达粜月的差异有统⒚庖咦榛峁際患者临床病理资料的分析发现癌组织中鞍妆达的阳性率与⒅琢龃笮┧ā⒉±矸只分级、术后复发转移有关系,有统计学差异;与性别、年龄、乙型肝炎表面抗原、肿瘤的数目、肝硬化、包膜无关,ò组织的表达高于癌旁组织;6哉兆镾蛋白表达阴