文档介绍：天津医科大学
硕士学位论文
miR--218对胶质瘤抑瘤作用及其机制的研究
姓名:孔妍玲
申请学位级别:硕士
专业:基础医学;病理学与病理生理学
指导教师:于士柱
2012-05
中文摘要【目的】.且恢种匾5囊至鑫⑿表达水平随其良恶性程度升高而相应降低,提示其表达减少或缺失可能在胶质瘤发生、发展中起到重要作用。生物信息学预测显示细胞周期蛋白依赖性激酶那痹诎谢颍医褐柿鯟泶锼剿嫫淞级裥猿潭壬匾煨郧玫虲泶锸欠袷歉胢发挥抑瘤作用的分子机制。【方法】①通过质粒转染和冉细餮窍赴抵谋泶锼健"诓捎糜ü馑孛甘笛椤及是否是的天然靶基因,探讨敲低表达的机制。③利用检测比较各亚细胞系细胞周期分布情况,分析诱导细胞周期阻滞和增殖抑制的分子机制。④通过活性检测及比较过表达亚细胞系及转染细胞凋亡水平的改变,通进一步验证特异性下调表达在其促凋亡作用中的意义。⑤利用同亚细胞系迁移侵袭能力的差异,通过补充外源性探讨特异性敲低种浦琢鱿赴ㄒ魄窒姆肿踊啤"蘩肳及免其表达异常可见于多种实体肿瘤及癌前病变。本室前期研究发现胶质瘤是高而相应增加,但在胶质瘤细胞中二者表达变化的确切关系如何,尚待进一步证实。本研究旨在观察在恶性胶质瘤细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及诱导细胞成熟分化方面的作用,证实是否奶烊话谢颍教秆〗⒐泶飉。,通过流式细胞术蚦认赴芷调节蛋白的过质粒转染补充外源性,观察对促凋亡作用的影响,以体外迁移侵袭实验、培养及定量侵袭实验比较泶锼讲是否是疫细胞化学染色检测不同亚细胞系癎泶锏牟钜欤鄄诙裥越褐柿鱿赴导敖褐柿龈上赴墒旆只械淖饔茫焕用免疫荧光观察下调癗泶锏奶匾煨裕煌ü鄄觳钩渫源性对俜只饔玫挠跋焯教痔匾煨郧玫虲欠袷莔一促进肿瘤细胞成熟分化的分子机制。天津医科大学硕士学位论文、
关键词:胶质瘤增殖凋亡迁移侵袭胶质瘤千细胞分化【结果】①..倍及..倍。②荧光素酶实验结果显示,赏疷结合,特异性降低荧光素酶的表结果显胞系。③泶镅窍赴礙粜员昙侵甘涂寺⌒纬尚示明显低于对照亚细胞系,。⑤迁移、侵袭实验结果及培养结果灾琢鱿赴ㄒ魄窒挠跋臁"。外源性可部分逆转疫荧光检测显示,蚇泶锝档吞匾煨缘胤⑸诔晒ψH緈.【结论】①本研究建立的译过程在转录后和翻译两个水平特异性敲低的表达。③是易化恶性胶质瘤细胞/傻闹匾<っ福琺。滞,并进而抑制恶性胶质瘤细胞的增殖活性。④捎盏级裥越褐柿鱿赴的凋亡,但该作用与其阻断表达无关。⑤捎行б种贫裥越褐柿亚细胞系,,证实是奶烊话谢颍籷及示,泶镅窍赴礐及蛋白表达水平均明显低于对照亚细表达水平明显高于对照亚细胞系,泶锼矫飨缘陀诤笳撸鳦谋泶锼轿廾飨圆钜欤籉结果显示,过表达亚细胞系期细胞比例增高,而诩癎Ⅵ期细胞比例相应减少。④泶镅窍赴礐活性明显高于对照亚细胞系,列转染细胞。外源性不能降低泶镅窍赴档腃活性及均显示,可有效抑制胶质母细胞瘤细胞系的迁移和侵袭能力,外源性可部分逆转泶镅窍胞系中癗泶锼矫飨缘陀诙哉昭窍赴担鳪泶镌斐傻纳鲜龅鞍椎谋泶锉浠幻达质粒且表达报导基因的肿瘤细胞。泶镅窍赴悼晌榷ǜ弑泶飉.②是的天然靶基因,可通过降解其和阻断其翻赏ü玫虲泶镉盏糋谧细胞的迁移和侵袭,表达下调是种魄ㄒ魄窒幕浦弧"捎盏级裥越褐柿鱿赴癎某墒旆只⒁种艷上赴硇偷谋达;特异性敲低是盏贾琢鱿赴墒旆只幕浦弧天津医科大学硕士学位论文
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缩略语/—一
研究现状、成果翮胶质瘤治疗现状高级别恶性胶质瘤占全部胶质瘤的%以上。恶性胶质瘤细胞增殖异常活跃、迁移侵袭能力极强,加之肿瘤生长部位特殊,手术很难将其完全切除,故常规治疗方法致残率、复发率和病死率均极高。目前在全身恶性肿瘤中,恶性胶质瘤的瓴∷缆式龃斡谝认侔┖头伟┒拥谌唬年生存率不足ィ叨榷性的胶质母细胞瘤患者的中位生存期仅鲈拢虼搜罢野踩行У幕蚝子机制,寻找对胶质瘤发生、发展起关键作用的责任分子和