文档介绍：山西医科大学
硕士学位论文
基于SNP分型的荧光定量PCR检测粒细胞嵌合体的研究
姓名:郑美婧
申请学位级别:硕士
专业:血液内科
指导教师:苏丽萍
20100315
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基于中偷挠ü舛縋检测粒细胞嵌合体的研究摘要色体上,包括四种碱基替换类型,其中觥獹,鯟/个刖个帷T谥泄巳褐目的:本研究旨在建立一种用于移植后特异性细胞嵌合体定量分析的新方法——基于针建立实时荧光定量ǎ阅D饬O赴逗咸褰屑觳猓靡云兰郾痉桨傅目尚行院线:..,扩增效率为,.。各个梯度浓度的平均值显示:该标俅脖瓯痉治觯河昧魇较赴欠盅〕例样本O赴敬慷却ィ⒌个月时对移植后受者样本计算嵌合率。粒细胞及外周血平均嵌合率分别为ズィ谕庵苎狝./裨血重建。例⑸毙訥诹O赴逗下嗜源τ%,外周血嵌合率时骨髓象复发,Q粜裕诹O赴巴庵苎G逗下式档土ズィ庵苎结论:流式细胞分选术可以高效、快捷地分离出高纯度的目的细胞。实时荧光定量狿方法,是对异基因造血干细胞移植后嵌合体检测的更为有效的方法。关键词:造血干细胞移植:粒细胞嵌合体;单核苷酸多态性;秸耄皇凳盤;基因分型的实时荧光定量际酰诩婀思嗖夥椒ǖ奈榷ㄐ浴⒏咝约熬眯缘幕∩希提高嵌合体监测分析技术的特异性、精确性和灵敏度。为移植相关免疫学研究提供良好的实验手段,并初步探讨该技术在监测移植后嵌合状态中的应用。方法:筛选了分别来自于醪煌旧宓个特异性坏悖铣上嘤Φ囊锖吞秸耄随机抽取例无关健康人模拟供受者,用流式细胞仪分选出O赴肅探准确性。最后分别对旎蛟煅8上赴±浦埠蟮耐庵苎Q星逗下史治觥结果:魇较赴盅〖际醴掷肓O赴河锰匾煨杂ü,通过流式细胞仪分选出O赴盅∠赴慷%,回收率ァ甋位点选择:从菘庵猩秆×个坏悖个坏惴植加诓煌基因频率介于~之间。赟分型的定量方法的建立:使用紫外分光光度计可准确测定样本ǘ取我们制作了位点任换虻谋曜记撸跹粜阅0寰凳盤扩增后,输出标准曲准曲线线性关系好,灵敏度不低于%。取基因组凳庇ü舛縋检测,确定供受者基因型,并分别于移植后第为%;例谝浦埠时,粒细胞及外周血嵌合率分别下降了%和ィ象正常。西医科大学硕士学位论文
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学位论文独创性声明学位论文版权使用授权书本人郑重声明,所呈交的学位论文系在导师苏丽萍教授指导下本人独立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果,均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果,也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时,署名单位仍然为山西医科大学。C苈畚脑诮饷芎笥ψ袷卮斯娑论文作者签名:指导教师签名:年旧鞯陌嫒ü樯轿饕娇拼笱校淳砜桑魏蔚ノ患叭魏胃鋈瞬坏蒙米允褂与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本文如违反上述声明,愿意承担以下责任和后果:⒔换匮J谟璧难恢な椋⒀?稍谙喙孛教迳隙宰髡弑救说男形=型ūǎ⒈疚陌凑昭9娑ǖ姆绞剑砸虿坏比〉醚桓T斐傻拿鸷Γ泄ǹ道歉。⒈救烁涸鹨蚵畚某晒皇挡姆删婪住有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权山西医科日期:月日
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期粒细胞嵌合体的动力学改变,研究尚有分歧【,在提示皿和方面的作用也有鰏,病灶琈约耙浦参锟顾拗鞑酗刖植后供受者嵌合状态对于防止移植失败的重要意义。众多研究显示,在分子水平上对嵌合状态分析,可作为判断移植物是否植入、移植物被排斥拿舾兄副辏绕涫乔逗咸宓亩考觳猓捎糜诟髦盅O赴亟ü媛傻奶教帧在接受造血干细胞移植后,受者体内存在供者来源的细胞,供受者双方于受者体内通三%,即完全供者嵌合状态移植后早期植入动力学研究显示:具有供体细胞高嵌合或稳定嵌合特点的患者可以获得无此,动态定量的嵌合体分析可在、及临床复发前进行早期识别和预见【和免疫抑制的方案不同、供者造血干细胞的来源不同,供者不同系列细胞的植入不同步,中,粒细胞作为释放细胞因子作用靶器官的下游效应细胞,其作用不容忽视,尽管移植早待进一步探讨,但对于髓系白血病