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致死型约氏疟原虫map2截短蛋白免疫活性的研究.pdf

上传人:2028423509 2014/6/3 文件大小:0 KB

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致死型约氏疟原虫map2截短蛋白免疫活性的研究.pdf

文档介绍

文档介绍:致死型约氏疟原虫截短蛋自免疫活性研究论文课题起止时间:.至旦至生嫉中国医科大学赡导论文完成时间:至月
指导教师签名:塑至塑盈期:知、争、汐塑垒主日期:型垒:丝:至岁中国医科大学研究生学位论文独创性声明中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。论文作者签名:本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学,且导师为通讯作者,通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容C苣谌莩,以采用影印、缩印或其他手段保存论文。日
目录一、摘要中文论著摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯英文论著摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯二、英文缩略语⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯三、论文材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯四、本研究创新性的自我评价⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯五、参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯六、附录综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯个人简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯日Ⅱ舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯—、£·—一
致死型约氏疟原虫截短蛋白免疫活性研究·中文论著摘要·刖疟疾是疟原虫经媒介按蚊传播引起的一种感染性寄生原虫疾病。在国内外,疟疾依然是高发的感染性寄生虫病。由于疟原虫对抗疟疾药品耐药性和蚊虫对杀虫剂抗药性的产生及扩散,人类与疟疾之间的斗争日趋激烈,研制安全有效的疟疾疫苗成为控制疟疾的重要途径和迫切需要。根据疟原虫的生活史,疟疾疫苗可分三大类:红外期疫苗、红内期疫苗和传播阻断疫苗。虽然部分红内期、红外期疫苗已经进入临床试验,但目前为止,还没有疫苗上市,在此情况下,针对疟原虫有性生殖阶段的传播阻断疫苗鸾ナ艿街厥樱晌E奔惨呙缪芯康娜鹊恪通过切断疟原虫在蚊体内发育的必要环节,阻止疟原虫向未感染人群的传播。虽然疟疾传播阻断疫苗的研究取得了一定成果,但总体上,这些研究大多停留在实验室阶段,很少进入临床试验期,筛选新的、具有良好免疫原性的传播阻断疫苗候选抗原具有重要意义。疟原虫受精或其他有性生殖阶段重要蛋白成分是传播阻断疫苗研究的靶目标。是公认的恶性疟原虫同源基因,其特异地在配子体阶段表达;研究显示,敲除恶性疟原虫基因,雄配子形成完全受阻,这些特点提示蛋白可能具有成为传播阻断疫苗候选抗原的潜力。根据以上研究,本实验以致死型约氏疟原虫蛋白作为研究对象,应用生物信息学方法对抗原的各种参数进行分析,从中筛选出所需基因片段,有目的地进行扩增,构建相应真核表达载体,进行动物免疫,观察其免疫活性,以期筛选出优势靶抗原,为疟疾传播阻断疫苗的研发提供理论基础和实验室依据。吾
方法一、约氏疟原虫基因片段的获取⒃际吓痹鍹蛐蛄蟹治方法从提取的基因组中扩增基因片段⒃嗽靥宓墓菇ḿ把粜钥寺〉募二、构建./表达载体产物琼脂糖凝胶电泳后回收目的片段⒄婧吮泶镌靥宓墓菇ḿ把粜钥寺〉募⒃际吓痹婊蜃镈的提取⒛捍炕疨产物⒛康幕虻幕袢扩增含有/质粒的大肠杆菌,提取质粒做为模板,设计引物锖鹗济苈胱印⒅罩姑苈胱印⒚盖形坏,┰鯩颉应用生物信息学手段,对致死型约氏疟原虫基因编码产物的抗原决定簇、跨膜区域等进行预测分析。用免疫教研室馈赠的致死型约氏疟原虫感染野生昆明鼠,感染第三天小鼠眼球取血,按照天根生化科技有限公司的血液基因组提取试剂盒说明书,提取疟原虫基因组将锴碇悄旱缬荆邢虑碇悄旱缬竞蠛康钠蔚慕嚎椋照天根生化科技有限公司的琼脂糖凝胶回收试剂盒说明书进行锏幕厥铡将所得的目的片段及一靥逵孟拗菩院怂崮谇忻窧及双酶切,琼脂糖凝胶电泳后分别回收所需目的片段及开环的一靥澹者连接,命名为/。挑取平板上生长的可疑阳性菌落进行增菌,质粒提取后用或单酶切鉴定。
将两者连接,命名为.。挑取平板上生长