文档介绍：安徽农业大学
硕士学位论文
不同启动子驱动GroEL基因和dsRNA介导的烟草抗TYLCV的研究
姓名:吴丹
申请学位级别:硕士
专业:生态学
指导教师:王荣富;张保龙
20090601
摘要双生病毒是一类世界范围内广泛发生的单链环状《荆言诙嘀种匾>米物上引起严重危害。在我国云南、广西等地的烟草、番茄和黄瓜等作物上也相继发现了多种双生病毒。本文将烟粉虱内共生菌产生的蚬菇ê煌舳拥闹参表达载体,并利用番茄黄化曲叶病毒重叠片段以反向重复的方式构建干涉表达载体。以农杆菌介导法转化烟草,并对转基因烟草进行了抗病性研究,得到如下结果:⑽A吮冉喜煌舳釉诳狗鸦苹恫《旧系男Ч钜欤肅启动子、棉花韧皮部特异启动子、拟南芥韧皮部特异启动子分别构建了⒎直鸾个植物表达载体转入根癌农杆菌曛校ǖ难粜宰化子用于烟草转化。烟草转化采用农杆菌介导法,将含虻呐└司胙滩菀盘共培养,经卡那霉素抗性筛选获得了一批转基因再生烟草植株。结果表明,三个启动子皆驱动蛟谧;蜓滩葜斜泶铩6宰;偕滩莸囊淮尾《咀⑸甈瓽和甋瓽载体的各有暄滩葜仓辏涣酱尾《咀⑸淝秩镜慕峁显示,获得昕剐匝滩葜仓辍7直鹞#鹤狿—靥宓株烟草植株,..靥宓母饔株烟草植株。两次接种的实验结果表明,和的转基因烟草植株的抗病效果均比舳用飨浴Vっ利用韧皮部特异表达蚩梢曰竦每狗鸦苹恫《镜淖;蛑参铩⑻逋夂铣晌夜鸦苹恫《镜腁、蛑氐区段,依据榈嫉腞际醯脑恚菇税正义链、内含子及匆辶的榈嫉腞靥錺瓵8迷靥搴械哪康钠挝7聪蛑馗葱蛄校B后反向重复序列相互配对,形成小发卡谑芴逑赴诰庸ぁ⒋沓晌卡那霉素抗性筛选、ḿ觳猓砻髂康幕蛞丫系窖滩莼蜃镈中。关键词:烟粉虱;番茄黄化曲叶病毒凰《荆籊基因;发夹籖沉默;,共有株抗性烟草植株,其中,转狦载体的暄滩葜仓辏的类肿樱舳疪干涉。⑼ü杜谭ǘ訰靥錺瓵醒滩莸淖;虮泶镅芯浚股甈瓽、猄籊。
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勘串:矿夕年屡研究生签名:曼时间:尴缒辍录尤独创性声明关于论文使用授权的说明C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意安徽农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名:第一导师签名:
文献综述群,它们导致了农作物的巨大损失【K《静〉谋┓⒅饕S膳┮导蓟稹】。《【。在过去的昀铮《居直涑扇却脱侨却厍:ψ钗Q现氐闹参锊《从世纪年代起,人们开始使用肥料、杀虫剂、农耕灌溉系统来大量繁殖单一品种作物,这些措施增加了介体种群在世界范围内的分布。另外,病毒强变异种的出现、感病植株的转移、抗病性弱植物的引入也为双生病毒病的出现创造了一定的条件【。双生病毒是植物病毒中唯一的一类具有孪生颗粒形态的植物单链环状毒,在世界范围内广泛发生,并已在多种重要经济作物上造成严重损失。双生病毒粒子的大小约为薨ぁ。刀;基因组为单组分或双组分结构,大小为~;通常由昆虫介体以持久性方式传播。双生病毒一般发生在热带、亚热带地区,温带地区也偶有发生。近年来,由于国际间贸易活动的加强、全球气候变暖和耕作制度的改变,导致了这种病毒在全世界范围内广泛发生并给作物生产造成了重大损失,如年,美国佛罗里达州,仅在番茄上双生病毒造成的损失就高达亿美元【俊曛年,巴基斯坦因棉花曲叶病毒的危害的损失为诿涝猍俊D壳埃丫谌却非洲、地中海盆地、东亚、南亚、中北美及加勒比海地区等地流行成灾,该病正在向周边未感染地区扩展,已在多个发展中国家中造成了严重的经济和社会问题【¨】。我国早在年就报道了广东番茄上有能经粉虱传播的病毒浚钡旯祖陨等通过电镜观察到烟草曲叶病毒孪生颗粒后,才证实了双生病毒在我国的发生【5鞘闭饫嗖《驹谖夜⑸段⑽:Σ淮螅⑽匆鹑嗣堑淖⒁狻W纪年代起,广西、云南和海南等地相继发现烟草、番茄、南瓜和番木瓜等多种作物遭受双生病毒危害【。在云南,双生病毒引起的香料烟曲叶病在局部田块病株率达%以上,在滇南烟区部分烤烟上病株率达%ィ鹧滩莶俊⒅柿康难重损失。而在广西的番木瓜和番茄上发病也很普遍,发病严重