文档介绍：南京师范大学
硕士学位论文
三种食用菌多糖提取分离及降血糖和抗氧化作用的研究
姓名:王峰
申请学位级别:硕士
专业:食品科学与工程;食品科学
指导教师:程光宇
2009-05-08
摘要
摘要
食用菌丰富的营养价值,较高的多糖等生物活性物质含量决定了它具有多种保
健作用,特别是抗氧化、降血糖作用。金顶侧耳(Pleurotus citrinopileatus Sing)、
姬菇(Pleurotus cornucopiae)和毛头鬼伞(atus)都是近年来具有开发和推
广价值的珍稀优质食用菌,他们营养丰富,具有多种保健及药用价值。
本文对金顶侧耳、姬菇和毛头鬼伞子实体多糖采取热水提取法得到粗多糖,粗
多糖经脱蛋白、透析等步骤后得到精多糖。粗多糖得率在 31~38%间,多糖含量在
20~51%间;精多糖得率在 15~19%间,多糖含量在 48~75%间。金顶侧耳、姬菇精
多糖经 Sepharose4B 分离,分别得到一个大分子多糖组分Ⅰ(得率为 %和 %)
和一个小分子多糖组分Ⅱ(得率为 %和 %),其中金顶侧耳这两个多糖组分
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有 O2 的清除活性,两种多糖组分Ⅰ的多糖含量为 92%和 93%,在波长 260nm 和 280nm
处无明显的吸收,表明两种多糖不含核酸和蛋白质;红外光谱显示它们具有多糖特
征吸收峰,属于α-型吡喃糖苷键。用 Sephadex G-200 凝胶柱层析法测得金顶侧耳、
姬菇和毛头鬼伞多糖的平均分子量分别约为 382208、303774 和 523359。三种食用
菌粗多糖总黄酮含量在 ~ 间,总酚含量在 ~ 间, 蛋白含量在
30~45%间,粗多糖精制后多糖含量上升 30%左右,姬菇和毛头鬼伞精多糖含量达
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70%以上。金顶侧耳、姬菇和毛头鬼伞精多糖与粗多糖相比对 O2 清除率分别提高
%,%和 %;对 OH·清除率分别提高 %,%和 %;对 DPPH·清
除率分别提高 %,%和 %。粗多糖经精制后,多糖含量明显提高,自由
基清除能力明显提高,表明多糖是清除自由基的主要功效成分。
在分析了三种食用菌粗多糖的生物活性物质、多糖含量和清除自由基活性后,
研究了粗多糖的体内降血糖和抗氧化作用。通过小鼠腹腔注射四氧嘧啶建立动物糖
尿病模型,以金顶侧耳和姬菇粗多糖(400mg/kg)分别灌胃糖尿病小鼠 28 天,同时以
降糖灵(100mg/kg)为药物治疗组,以正常小鼠为对照组,测定了 0、6、14、21、28
d 时空腹血糖值和 28 d 时糖耐量。动物处死后,取血液测定小鼠糖化血红蛋白(GHB)
含量及血脂水平,并测定了小鼠血液和脏器的抗氧化指标。结果表明,与模型组比,
灌胃食用菌粗多糖能明显改善糖尿病“三多一少”病症,能显著降低空腹血糖值
(P<)和血糖曲线下面积(AUC)(P<),给予两种食用菌粗多糖后血糖下降百分
率都大于 15%,并使 GHB 含量恢复到正常水平(P>),还能使糖尿病小鼠胆固醇
(TC)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量恢复到正常水平。金顶侧耳和姬菇粗多糖
能够显著提高糖尿病小鼠血液超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶
(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活力和非酶体系抗氧化能力,抑制丙二醛(MDA)
I
摘要
形成,提高谷胱甘肽(GSH)含量和总抗氧化能力(TAOC), 同时也能显著提高
小鼠肝和肾的 SOD、CAT 活性及 GSH 含量,降低 MDA 含量。
多糖是三种食用菌清除自由基的主要功效成分,且本研究已表明粗多糖具有一
定的降血糖和抗氧化功效,在此基础上将粗多糖进行提纯,进一步研究精多糖的降
血糖和抗氧化作用。
通过小鼠腹腔注射四氧嘧啶建立动物糖尿病模型,以金顶侧耳、姬菇和毛头鬼
伞精多糖(低剂量组 100mg/kg,高剂量组 400mg/kg)分别灌胃糖尿病小鼠 30 天,同
时以优降糖(100mg/kg)为药物治疗组,以正常小鼠和灌胃金顶侧耳、姬菇和毛头鬼
伞精多糖(400mg/kg)正常小鼠为对照组,测定 0、7、14、22、30 d 时空腹血糖值和
30d 时糖耐量。动物处死后,取血液测定小鼠糖化血红蛋白(GHB)含量、血脂指标
及肝脏 TG 水平,测定小鼠血液和脏器的抗氧化指标,并采用 4%~35%的聚丙烯酰
胺梯度凝胶电泳分析抗氧化酶同工酶。结果表明:灌胃三种食用菌精多糖 30 天后
与模型组比能明显改善糖尿病“三多一少”病症,能显著降低