文档介绍：天津医科大学
硕士学位论文
致肾盂肾炎大肠杆菌132的比较蛋白质组学研究
姓名:郭丽茹
申请学位级别:硕士
专业:病原生物学
指导教师:陈锦英
20090501
中文摘要结果:目的:方法:昃で呦嗨疲淘莸某倩浩诤蠼攵允て研究国内分离的致肾盂肾炎大肠杆菌牍饽P途闡巴瓿苫蜃椴庑虻姆侵虏⌒。、生化反应、觳猓ň辍捎帽茸欠ń邢妇剖⒒嬷聘骶甑纳で摺R源宋R谰荩直鹋嘌至对数生长前期和后期胄氖栈窬澹凭票杆蚰胶电泳蛋白样品,法测蛋白浓度。呕妇嘌退蚰旱缬镜氖匝樘跫将煌嘌奔涫获的菌体或不同梯度下进行的双向凝胶电泳图谱进行比较分析;的基因组注释结果,使用/海痺..痶/甴计算,构建其理论双向凝胶电泳图谱,预测其全部蛋白点的分布情况;胮腎胶条对甤的胞内蛋白样品进行双向凝胶电泳,与其理论双向电泳图谱进行比较,计算分辨率。谰萦呕奶跫直鸲匀昃牡鞍籽方兴蚰旱缬荆缬竞缶马斯亮蓝染色,采集图像,:诵模∪∑。,生化反应符合大肠杆菌。峁允荆篣蚃均出现预期难粜岳┰龃而甤没有显示此扩增带,可确定前二者为菌株。昃嘌栈窬逯票赴诘鞍椎缬狙罚涞鞍着ǘ确直鹞#天津医科人学硕士学位论文甤甎
结论:/,培养票傅陌诘鞍籽嘌双向凝胶电泳图谱分布相似,经/./、./及./,结果符合要求。蚰旱缬臼匝樘跫挠呕治砑分析,前者分辨出龅鞍椎悖笳呶个蛋白点,后者蛋白点较前者增加了ァ璸腎胶条分离获得的双向电泳图谱中蛋白点集中于区间,碱性区域蛋白点稀疏;而用的禾醴掷氲双向电泳图谱中蛋白点分布均匀,分辨率较好。经软件分析表明,二者蛋白点数分别为,后者分离效果明显优于前者。全菌蛋白的理论双向凝胶电泳图谱显示:.サ睦论蛋白点都集中于之间,.サ睦砺鄣鞍椎惴植加趐间,只有%,。据报道,在当前试验条件下双向凝胶电泳分辨率尚不超过理论值的%,故本试验的分辨率较为理想。蚰旱缬窘峁允荆篣骄侗龅鞍椎悖琂平均识别个蛋白点,甤平均识别个蛋白点。三株菌共有的蛋白点为.,.,蚃共有的蛋白点为个%匾斓牡鞍椎阄.,匾斓牡鞍椎阄.,特异的蛋白点只有%,鑫猆隞均上调表达的蛋白点,涉及毒力因子、物质代谢转运、蛋白合成调节、生物氧化及未知功能等。,通过对三者之间蛋白表达的差异分析,发现了菌株与非致病性大肠杆菌间的蛋白质组有差异,隞蛋白质组问也有显天津医科人学硕十学位论文./、.甤
关键词:致肾盂肾炎大肠杆菌比较蛋白质组学双向凝胶电泳质谱分析著不同,表明菌株存在多态性和国内外菌株的差异,为致肾盂肾炎大肠杆菌的致病机制等深入研究奠定了基础。致病机制天津医科人学硕十学位论文
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符号说明心缩略语英文全称籟一一中文全称大肠杆菌尿路致病性大肠杆菌/致肾盂。肾炎大肠杆菌尿路感染肠道外致病性大肠杆菌甘露糖抗性血凝脂多糖基因表达序列分析双向凝胶电泳致病岛籟胆酰胺基丙基二甲氨基撬嵫二硫苏糖醇苯甲基磺酰氟乙二胺四乙酸十二烷基硫酸钠碘乙酰胺过硫酸铵四甲基乙二胺光密度牛血清白蛋白Φ奈舛固相胶条等电聚焦天津医科人学硕宦畚阠甤瓺疉猟,.
—.聚丙烯酰胺凝胶电泳等电点分子量乙腈羟基肉桂酸基质辅助激光解析电离飞行时间质谱肽质量指纹图谱串联质谱开放读码框表面抗原谷氨酸脱羧酶幌佘找籐一高半胱氨酸水解酶核蛋白体蛋白质延长因子细胞坏死因子溶血素自转运蛋白毒素耐热血凝素非核糖体肽合成酶抑制性消减杂交天沣医科大学硕士学何论文甅猺甈/—·
醐:叩刖日学位论文作者签名:逊日期:砷年露啵口,在——年解密后适用本授权书。期:研年岁月籈学位论文原创性声明学位论文版权使用授权书不保密囹。本人郑重声明:所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外,论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,并采用影印、缩印或扫描等复制