文档介绍：湖北中医药大学
硕士学位论文
叶酸壳寡糖修饰的PLGA纳米粒作为抗肿瘤载体的研究
姓名:胡振夏
申请学位级别:硕士
专业:药物分析学
指导教师:符旭东
20120510
叶酸壳寡糖修饰的纳米粒作为抗肿瘤药物载体的研究摘要纳米载药系统作为肿瘤药物的载体具有高效、低毒和缓释的优点,经过配体修饰的纳米粒,可特异性地被肿瘤细胞摄取,降低药物对正常细胞的损害。紫杉醇琍谴雍於股际糁参锏氖髌ぶ刑崛〉玫的二萜类化合物,具有独特的微管稳定作用,临床上主要适用于卵巢癌和乳腺癌。,由乳酸和羟基乙酸聚合而成,其在体内的最终代谢产物为水和二氧化碳,具有良好的生物可降解性和组织相容性,作为药用辅料已被美国肌6羧基瓹是在聚合时保留聚合物链末端的羧基,以便可以对聚合物进行进一步的改性反应。叶酸是人体必需的一种维生素,但人体无法自行合成,必须从食物中摄取。叶酸受体是细胞膜表面的一种糖蛋白,叶酸与叶酸受体结合后,细胞通过内吐作用摄取叶酸。叶酸受体在肺、胸腺、肾等正常组织中呈低水平表达,而在一些肿瘤组织呈高水平表达。用叶酸对纳米载药系统进行修饰可以赋予纳米载药系统主动靶向本课题以端羧基为载体,制备了载紫杉醇的纳米粒。纳米粒的处方和制备工艺。采用乳化溶剂挥发法制备纳米粒,通过单因素实验对纳米粒的处方和制备工艺进行了优化。优化得到的处方和制备工艺为:∮%超声条件为:超声,间歇,超声蠼ǔ跞榈谷搅拌下的等体积的纯化水中,搅拌挥发有机溶剂。制备得到的纳米粒平均粒径为匾┝课.%±ィ饴饰ァ.%。采用界面沉积法制备紫杉醇纳米粒,。以载药量、包封率、纳米粒的粒径为主要考察指标,优化了紫杉醇
米粒的处方和制备工艺进行优化。优化得到的处方和制备工艺为:紫杉醇苡丙酮中作为有机相,在·搅拌下,将有机相逐滴加入的溶液中,搅拌约蠼K偌踔·,继续搅拌使丙酮挥干,得到带蓝乳光的澄清溶液,微孔滤膜滤过后即得纳米粒混悬液,得到的纳米粒粒径为纋,电位为..,包封率较高等优点,最终以界面沉积法制备紫杉醇采用碳二亚胺法制备了叶酸偶联的壳寡糖。用灰一谆基丙基级前费嗡嵫砸端岬聂然谢罨儆肟聚糖和壳寡糖上的氨基结合即得,并用紫外光谱和红外光谱对产物进行了确证。以叶酸的浓度及其对应的在Φ奈庵担扑愕玫搅艘端的标准曲线:.,其中浓度单位为将制备得到的叶酸壳寡糖溶于水后测定其在Φ奈庵担扑阋酸偶联率。最后确定的反应条件为:叶酸约珽·,溶解于疞溶液中,加入约枪烟牵涟柘录尤叶酸溶液,室温下避光反应7从崾笥肙./鹘诜从σ至蠊耍艘河么罅看炕肝后冻干即得叶酸壳寡糖。该法制备的叶酸壳寡糖的叶酸偶联率约为.%。用叶酸偶联的壳寡糖对纳米粒修饰。用訮擅琢表面的端羧基进行活化,再与叶酸壳寡糖上的氨基连接。反应条件为:称取叶酸壳寡糖和约,用纯化水溶解,搅拌下,加入纳米粒混悬液,室温下反应,.微孔滤膜滤过即得叶酸壳寡糖修饰的纳米混悬液。修饰后的纳米粒粒径为繭.,电位为..,载药量±ィ饴.%,纳米粒的叶在体外细胞实验时,选用了卵巢癌细胞系,用ǹ疾纳米粒。酸偶联率约为ァ
了紫杉醇纳米粒混悬液及紫杉醇溶液对细胞的抑制效果。通过前期实验,初步筛选出最佳紫杉醇浓度为ǎ饔檬奔湮。实验显示紫杉醇在作用时间倍韵赴囊种谱饔么锏阶畲螅后,紫杉醇溶抑制率上升。在作用时间保奘魏竽擅琢6韵赴囊种坡视胱仙即溶液对细胞的抑制率相当。在不同作用时间下,修饰后紫杉醇纳米粒对细胞的抑制率均强于相同浓度的未经修饰的纳米粒。主题词:纳米粒;紫杉醇;叶酸靶向;壳寡糖液对细胞的抑制作用开始下降。而纳米粒随着作用时间的延长,对细胞的
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言前卵巢癌是严重威胁妇女健康的常见的恶性肿瘤,发病率占女性恶性肿瘤的第六位。近年来卵巢癌的发病率有上升的趋势,每年以%的速度增长。卵巢癌预后差,其死亡率为女性生殖道恶性肿瘤之首。化疗药物的安全系数小,在杀伤癌细胞的同时产生严重毒副作用。由转运蛋白介导的药物外排机制使药物在肿瘤细胞内不能维持有效杀伤浓度,导致肿瘤细胞多药耐药。治疗缺乏特异性和肿瘤细胞的多药耐药是最终导致化疗失败紫杉醇是从红豆杉属植物中提取出来的一种具有高效抗肿瘤活性的天然物质。它是一种抗微管药物,通过促进微管蛋白聚合抑制解聚,保持微管蛋白稳定,抑制细胞有丝分裂。临床主要适用于卵巢癌和乳腺癌,对肺癌、大肠癌、黑色素瘤、头颈部癌、淋巴瘤、脑瘤也都有一定疗效,结构式见图A俅采鲜褂玫淖仙即甲⑸浼劣捎谌狈