文档介绍：天津科技大学
硕士学位论文
L-亮氨酸产生菌的选育及其发酵条件的研究
姓名:宋超先
申请学位级别:硕士
专业:发酵工程
指导教师:陈宁
20040101
要摘曰粕ǘ谈司鶷籘贖/本文以代谢控制发酵理论为指导,重点研究了涟彼岵难∮3龇⒕辏蛩岫阴ァ⒆贤庀叻直鹩肼然春嫌毡洌∮鲆,在未经优化的摇瓶分批发酵条件下,亮氨酸产量由出发菌株芯苛司闠囊∑糠峙⒔吞跫Sτ镁壬杓坪蚆软件获得该菌株优化的种子培养基和发酵培养基配比,并对种子培养条件和砸∑糠峙⒔妥钣盘跫;。跃闠辛⒔凸分批发酵试验,该菌株发酵鶯亮氨酸.∥R薹峙⒔褪验数据为依据,对涟彼岱峙⒔投ρЫ辛搜芯浚⒘司迳ぁ产物形成和底物消耗的动力学模型,并应用软件进行模型拟合,拟合模型较好地反映了涟彼岱峙⒔,在发酵罐分批发酵试验中可产恋K/>暌其发酵条件。主要研究内容和结果如下:株带有起始全部标记且利福平抗性提高至/的涣涟彼岵∥岣咧疞。发酵培养条件进行了研究。在优化条件下,菌株摇瓶补料分批发酵刹鶯涟彼疞。传性状稳定,具备生产潜力。关键词:涣涟彼幔粕ǘ谈司春嫌毡洌F娇剐裕湮驴刂疲沽分批发酵,分批发酵动力学的天津科技大学硕士学位论文
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秸。一。把由涟彼岷铣傻亩嗑畚铮橇偈贝瓷朔罅系淖罴言现弧准ň叻⒄涟彼琇荘晔紫却幽汤抑蟹掷氤话装彼幔琇一话被一甲基戊酸比旋光度解离常数.,.,不溶于氯仿和甲醇,在乙醇中微溶,水中溶解度%涟彼崾侨擞攵镒陨聿荒芎铣啥匦胍览低庠垂└陌舜蟊匦璋基酸之一,是临床选用的复合氨基酸静脉注射液不可缺少的原料。涟酸对维持危重病人的营养需要,抢救患者生命起着积极作用。亮氨酸可用于诊断和治疗突发性高血糖症和作为头晕治疗及营养滋补类药物。涟彼峄箍捎糜诤铣删哂锌拱⒖共《尽⒁、、配合物【啊W钚卵芯勘砻鳎涣涟彼岬亩ㄐ院投坎舛ǚ椒ㄓ兄缴追ā⒅缴滓幌赐驯壬ǚā来的,以后蛹∪庥胙蛎ǖ乃崴馕镏械玫狡浣峋В⒍A氨酸【”。其化学结构式为:亮氨酸的理化性质及用途名称涣涟彼化学名话被旒核相对分子质量熔点ご!,微苦溶解性涟彼岬牟舛ǚ椒引言分子式分解呈味性潜质。别名琧:灭津科技大学硕士学位论文.。:’
生物测定法、高效液相色谱法、氨基酸分析仪测定法等。纸色谱法常用于示菌混匀倾注平板。在该平板上点种待测菌或在滤纸片上点离心过的发酵确性最好,但设备昂贵,测样成本高。涟彼岬纳椒、添加前体发酵法【俊直接发酵法睁取醇再制成氨基腈后水解,或将异戊醛先制成乙内酰尿衍生物后加压加热水⑸镒;ㄓ殖铺砑忧疤宸⒔头ā@闷咸烟俏7⒔吞荚础⒛源,再添加目的氨基酸的前体物,经特定微生物的代谢转化作用将该前体定性,展开剂常用“正丁醇:冰醋酸:水:”:显色剂常用/崛酮丙酮溶液:显色温度妫萆ò逺刀ㄐ浴=ò呦赐押蟛馕度,根据标准曲线的回归方程来计算样品的亮氨酸含量。生物测定法是用狶。菌作指示菌,用添加有除酝獾陌被岬幕九嘌胫液。培养后,依据指示菌生长圈的有无及大小,与标准样对照比较,可定性和估测产酸多少。高效液相色谱法和氨基酸分析仪测定法的测定结果准涣涟彼岬纳椒ㄓ刑崛》ā⒒Ш铣煞╢涣涟彼嵩诘鞍字手泻拷隙啵ǜ衫宜亍⒔堑鞍住⒗壬卦谒嵝蕴件下水解,用碱中和即有亮氨酸沉淀,用惠练崾钩恋斫峋В美虢环ā层析法分离。国内虽有由天然蛋白质水解液分离提取涣涟彼岵罚ǜ方法工艺费时、收率低,不适合大规模工业化生产。.Ш铣煞化学合成法又分法、宦贝岱ǖ取G胺ㄊ墙煳烊┲瞥汕解;后法是将异己酸在三氯化磷存在的情况下加入溴生成讳逡旒核幔与氨作用生成亮氨酸。.⒔头发酵法是利用微生物菌体的生物合成作用,过量积累涣涟彼岬墓獭包括微生物转化法和微生物直接发酵法。物有效地转化为目的氨基酸。德国学者】采用分批流加培养法,流加生物合成涣涟彼岬那疤逦飊一酮基异己酸疞,》菌⒔∈保鶯厂亮氨酸一把一‘
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