文档介绍：天津大学
硕士学位论文
丹酚酸B对内皮细胞保护作用的蛋白组学研究
姓名:李晶
申请学位级别:硕士
专业:制药工程
指导教师:元英进
20070101
中文摘要关键词:.赴趸鹕吮;ぃし铀酈,定量蛋白组学,治疗,心血管疾病的传统中药丹参中一个主要抗氧化水溶性成份一丹酚酸对血管细胞有多重保护作用。为了阐述阅谄は赴鸈瓾氧化损伤保护作用的机理,本研究在建立訣瓾细胞氧化损伤保护模型的基础上,运用标记比较蛋白组学方法,对①正常培养细胞:②预处理后再用损伤的细胞;③直接用损伤的细胞中可溶性蛋白的表达情况进行比较研究。共鉴定出隹扇苄缘鞍祝渲个蛋白在三种不同情况下发生了显著变化。其中龅鞍追直鹗粲谙赴B挤氲鹘谝蜃印⑾赴蛲雎肪兜囊种萍梁拖胞防御体系,它们的变化情况可以解释谋;ぷ饔没啤T谧B挤氲鹘因子表达方面:细胞经ご砗笤偈艿窖趸鹕耸保胝E嘌南赴直接受到氧化损伤的细胞相比,转录翻译调节因子和谋泶锪棵飨陨系鳌T谙赴蛲鐾揪兜鞍追矫妫孩傧赴蛲雎肪禦路径的抑制剂—泶锪吭谙赴璖ご砗笤偈艿窖趸伤时,与正常培养细胞及直接受到氧化损伤的细胞相比明显上调,纳系饔兄谝种葡赴艿窖趸鹕耸盧凋亡路径的启动;②、的抑制剂谋泶锪吭谙赴苯邮艿窖趸鹕耸庇正常细胞相比明显上调,而经ご砥渖系鞒潭让飨栽黾樱琀的上调有助于抑制凋亡路径中的最终凋亡执行分子傅幕钚越柚瓜赴向凋亡。在细胞防御体系蛋白表达方面:①细胞防御体系中的热休克蛋白和谑艿窖趸鹕说奶跫卤泶锪烤系鳎璖ご碚饬礁龅鞍椎上调程度明显增加;②维持细胞自身平衡状态的蛋白甃璖ご砗再受到氧化损伤时与正常培养细胞相比,表达量明显上升,而直接氧化损伤时无明显变化。本实验的研究表明:韵赴趸鹕说谋;ぷ饔糜肫湟种葡赴蛲黾促进细胞防御系统蛋白表达有关;而这些蛋白表达上调是由鸬淖B挤译调节因子表达量上调所致。记
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元凌丛学位论文作者签名:鸯晶如辏弓日签字日期:矽少年/月:独创性声明学位论文版权使用授权书签字日期:二唧年履巳或撰写过的研究成果,也不包含为获得苤奎盘堂或其他教育机构的学位或证本学位论文作者完全了解墨盗盘茎有关保留、使用学位论文的规定。特授权苤壅盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄋ得本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢之处外,论文中不包含其他人已经发表书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。签字日期:索,并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘。导师签名:
要成份一丹酚酸刖中药是我们中华民族的瑰宝,但目前还很难以药品的形式进入西方主流市场,主要是因为其物质基础不清、作用机制不明,而中药的物质基础、作用机理等基础理论问题也是中药现代化、国际化的难点和关键。中药的作用机制涉及多成分、多靶点、多途径,其药理理论是建立在整体观念上的科学,这与西药的理论有明显差异,很难采用传统的西药药理学的靶点和途径研究方法来对中药进行评价。而蛋白组学可以从生命活动执行者蛋白质整体变化的水平上研究机体对外界刺激的反应机制,这种思想恰恰与中药的作用理论不谋而合,会更好地反映中药的药效及作用机制】。目前还鲜有将比较蛋白组学的方法用于中药的作用机制的研究,从疗效较好的中药中作用效果明显的单一组分开始,建立系统生物学的研究平台,逐步研究单一组分、单味药、复方药对生命活动执行分子蛋白的表达及翻译后修饰的影响,将有利于从系统生物学水平阐述各单一组分、单味药、复方药的作用机制以及复方药作用的优势。这种研究方法的摸索及研究平台的建立对中药现代化的发展将起到不可估量的作用。丹参是一味长期以来用来预防和治疗动脉粥样硬化的传统中药,它的一个主对血管细胞有多重的保护作用,尤以其对内皮细胞氧化损伤的保护作用最为明显【’。研究表明孕难9芟赴谋;ぷ饔糜其可以调节细胞内多种蛋白的表达以及多种酶的活性密切相关。所以从血管内皮细胞的氧化损伤保护作用机制入手,用比较蛋白组学的方法从细胞内蛋白变化的整体水平上进行研究,将有助于解释淖饔没疲⒖赡艹晌S比较蛋白组学的方法研究中药作用机制的一个成功实例。从另一个方面,由于血管内皮细胞是血管的屏障,内皮细胞的氧化损伤已被证明是动脉粥样硬化病发生发展中的一个关键事件【。以保护作用明显的中药单一成分在体外内皮细胞水平上建立氧化损伤保护模型进行研究,也将有助于氧化损伤机制的理解和心血管疾病发生发展的研究。吾罱
第一章文献综述内皮细胞氧化损伤与心脑血管疾病的发生如维生素⑽谽、谷胱甘肽掣。在正常的生理条件下,机体代谢产生的活/沸俊甼