文档介绍：安徽农业大学
硕士学位论文
牛GV期卵母细胞冷冻保存的研究
姓名:汪存利
申请学位级别:硕士
专业:动物遗传育种与繁殖
指导教师:章孝荣;陶勇
20050601
中文摘要卵母细胞冷冻保存能够充分利用各种来源的卵母细胞,可为体外受精、核移植、转基因等胚胎工程技术的研究和应用实时实地提供大量实验材料。目前,牛卵母细胞的冻存多采用成熟卵母细胞,而有关生发泡卵母细胞尚缺乏系统的研究。本实验研究了牛期卵母细胞冷冻保存中非渗透性保护剂、预处理时间、冷冻载体及不同大小卵泡卵母细胞对冷冻保存效果的影添加各浓度的蔗糖或月涯赶赴澈笈嘌墒炻什钜觳幌灾,但崽呛蚻时,与未添加组相比,能显著提高卵母细胞冻为了检测玻璃化冷冻保护液的毒性作用,将牛期卵母细胞分别用作对照。结果显示,室温条件下,,即毒性作用随浓度和处理时间的分别以玻璃细管和麦管作为冷冻载体,玻璃化冷冻牛期卵母细胞后的成熟率,%;麦管二步法%,一步法%。玻璃细管二步平衡法玻璃化冷冻牛期卵母细胞时,。玻璃细管~步法玻璃化冷冻时,程序化冷冻牛期卵母细胞,分别将冷冻保护剂,,·。随后,以I感员;ぜ粒直鹛砑崽牵ィィ,结果显示,单独蔗糖篍篎:,,,,以上时,成熟率极显著低于对照组;在写时,成熟率即显著低于对照组以上时,,不会对卵母细胞产生毒性作用,而虴结果显示,同一载体二步法与~%,用直鸫砺涯赶赴,,澈蟪墒炻史直鹞%,.ィ响。叶同时添加后培养的成熟率%聚蔗糖和或用:::分别处理,陨鲜保增加而增加。儆肊处理ァ处理珿期,,哉兆,,,,,理,】,.%,。%
从最高成熟率看,玻璃细管二步法甇%,玻璃化冷冻法的冷冻效果优于程序化冷冻法。以玻璃细管为关键词:牛期卵母细胞程序化冷冻玻璃化冷冻灾哂诖管冷冻的二步法%鸵徊椒%,说明无论是一步还是二步冷冻法,玻璃细管载体均优于麦管。冷冻载体,分别抽吸卵巢上卵泡的卵母细胞,进行玻璃化冷冻保存。结果发现,两组冻后成熟率无显著差异%.ィ。以上结果说明,程序化冷冻牛期卵母细胞时,在冷冻保护剂中同时添加崽呛能有效提高冻后成熟率;玻璃化冷冻牛期卵母细胞,用玻璃细管作冷冻载体,二步处理菶较好;玻璃化冷冻法要明显优于程序化冷冻法;,冷冻效果,再相近。。
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缩略表Ⅳ含%聚蔗糖和崽:乙二醇:胎牛血清,:促黄体素英文全称攀狭姿嵫位撼逡二甲基亚砜毛细玻璃管开放式手拉纠管胎牛血清促卵泡素体外成熟缩略词中文甘油丙二醇乙二醇生发泡卵丘卵母细胞复合体%.’::狿—
肆。舻皿蚪时间:淅白妇时间:如酽络关于论文使用授权的说明独创性声明时间:庐峥,年C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特另以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意安徽农业大学可以用不同方式在不同研究生签名第一导师签名
哺乳动物卯母细胞冷冻保存的研究进展文献综述卵母细胞冷冻保存原理诱发结晶冷冻保护剂对卵母细胞的保护作用而得名,常用的有甘油珿、二甲基亚砜珼、可以增加精子的活力,成为低温生物学发展的里程碑。年,’等首次用慢速冷冻法成功保存小鼠胚胎,胚胎冷冻技术得到迅速的发展。年,#骸痹俅伪ǖ懒死醋岳涠场⒔舛承∈舐涯赶赴玫交钭校て鹧芯者对人类、家畜、实验动物卵母细胞的大量研究。引。哺乳动物卵母细胞的冷冻保存,可充分利用各种卵母细胞资源,为体外受精、核移植等胚胎工程技术提供哺乳动物卵母细胞的超低温保存,是指在超低温。条件下抑制细胞精、卵裂等发育潜能的一种保存技术。象叫过冷现象。过冷现象的产生