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5-Fu诱导大鼠肺损伤修复过程中Oct34表达及意义.pdf

上传人:minzo 2014/6/16 文件大小:0 KB

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文档介绍

文档介绍:指导教师签名:鲢日期:塑墨:鲨论文作者签名:笪盗纽论文作者签名:苎中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书中国医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学,且导师为通讯作者,通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容C内容除外圆捎糜坝⑺跤』蚱渌侄伪4媛畚摹
目录\一、摘要中文论著摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯英文论著摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯二、英文缩略语⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯三、论文前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯结住四、本研究创新性的自我评价⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯五、参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯六、附录综帧在学期间科研成绩⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。致弧个人简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯月Ⅱ舌⋯..⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯·
的材料与方法锄是指能不断自我更新并在特定条件下分化为功能性目一、标本收集肺干细胞肺组织的细胞。由于肺的上皮结构和细胞组成非常复杂,其细胞种类多达余种,加上呼吸道上皮具有极低的生长更新率和十分有限的再生能力,导致对肺干细胞的研究进展不如其它组织。但是在肺损伤后干细胞分裂加速,通过不对称分裂的方式产生子代干细胞及各个组织细胞的祖细胞,最终产生终末分化的细胞以补充受损的细胞,起到促进创伤修复的作用。近年来人们相继发现多种细胞在发育过程中表现出肺干细胞特性并在肺损伤修复中发挥作用,但是根据干细胞定义,很多这类细胞属于祖细胞的范畴,而不是真正意义上的肺干细胞。我们实验室曾首次建立了瓼⒗胩迤芩鹕诵薷茨P停⑾,增殖期气管上皮细胞变性、坏死,而残留在基底膜上的期细胞出现胚胎干细胞相关基因/表达,当期细胞出现向基底细胞、纤毛细胞、粘液细胞分化后,、、泶锵АQ芯恐っ鱋、、阳性细胞为气管干细胞。但籉栽抖朔紊掀に鹕诵薷垂讨信咛ジ上赴喙鼗因/浠绾危壳吧形薇ǜ妗本研究通过制备籉盏挤卧抖松掀ふ衬に鹕四P停鄄炱渌鹕诵薷垂讨的/浠<ā⒎掷朐抖朔紊掀じ上赴峁┬碌囊谰荨雌雄不限大鼠~河谥泄娇拼笱Ф锊唬婊殖墒笛组和对照组,实验组:籉鹕撕组,椋组,椋孔只,对照
一、诱导大鼠肺损伤修复过程中远端肺上皮细胞改变及二、实验方法/谋泶锉浠组:未经处理,共弧R颐崖樽砗蠼ù笫蠊潭ㄔ谥Ъ埽衅懿骞苤疗芊叉处,利用%生理盐水将配制成痬疜亮抗嘧⒋笫蠓文冢对照组注射等剂量的7直鹪诠嘧,,蟠λ来笫笕⌒孪史部组织。细胞系来源于中国医科大学病理教研室。将各个时间点的鼠肺组织及正常鼠肺组织收集,一部分用于石蜡包埋切片后行染色、间接免疫荧光染色,确定组织损伤后的修复情况及/泶锴榭觯并用双重免疫荧光染色观察/搜粜韵赴蚐瓹、双阳性细胞的关系。将另一部分肺组织收集,进行检测,观察/鞍妆泶锴榭觥在肺癌细胞系中,本课题组已经通过体外药物敏感实验,得到瓼佳作用浓度为./7蜗侔┫赴/密度接种于嘌恐校养的肺腺癌细胞分为两组:一组是没有药物作用的肺腺癌细胞;另一组是经过瓼饔煤蟮姆蜗侔┫赴直鸾忻庖哂ü馊旧ê蛍检测,观察/谋泶锴榭觥所有的免疫荧光实验和蛋白印迹实验均独立重复三次,所得数据的值用均数标准偏差来表示。,当衔S型臣蒲б庖濉正常大鼠肺组织在经瓼蚧∈焙螅鱿种漳┫钢堋⒎闻萆掀は胞变性、坏死,上皮细胞减少,开始出现/搜粜员泶铮后终末细支气管、肺泡上皮只剩残留的少量细胞,/搜粜员泶镌龆啵锏礁叻澹、后,终末细支气管、肺泡上皮逐渐修复,恢复原有肺泡结构形态,/搜粜表达逐渐减少。正常终末细支气管、肺泡上皮未检测到/泶铮掀は赴甲勿当日
二、蛋白印迹检测大鼠肺泡上皮损伤修复过程中/鞍妆泶三、肺组织