文档介绍：指导教师签名:乏兰缁:至盎缝盘日期:型芝:￡::羔中国医科大学研究生学位论文独创性声明中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。论文作者签名:本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学,且导师为通讯作者,通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容C苣谌莩,以采用影印、缩印或其他手段保存论文。期:皇翌芝:￡:日。!!!⒁
目录一、摘要中文论著摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·英文论著摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·二、英文缩略语⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·三、论文材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·四、本研究创新性的自我评价⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·五、参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·六、附录综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·在学期间科研成绩⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·个人简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·刖百⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘.ぁ猨
ü吧蚿与俳伟┫赴凋亡·中文论著摘要·刖且焕喑ざ仍嘉龊擞K岬姆潜嗦胄》肿覴。ü耆ɑゲ够虿糠只ゲ狗绞绞侗鸢谢’一苯咏到獍衜蛞制其翻译,而抑制靶基因表达,调控细胞凋亡、增殖和分化。因此,谥琢的发生和发展中起着重要的作用。莔家族成员之一,存在前体和成熟体两种形式,其成熟体具有生物学活性。目前发现其有两种成熟体一与本课题组前期实验发现疭诜伟┫赴杏際相比呈低表达,转染正义苁狗伟〢赴趍一一/含量增加,促进细胞凋亡,同时野生型泶镆菜嬷撸H痉匆錷一一/则与之相反,但其调控机制尚不清楚。因此,我们认为赡芡ü调控野生型俳鳤赴蛲觥利用多种预测软件通过对赡茏饔玫陌谢蚪性げ夥⑾郑能抑制陌┗騇赡苁莔一一/的共同靶基因;猈基因可能是餐谢颉一蚩赡芙鍪莔一一靶基因。是目前研究比较深入的促凋亡因子;獁、是家族成员,二者均为凋亡抑制因子。因此,我们推测疭赡苁峭ü齅痯、獁、途径调控肺癌细胞凋亡。本实验将通过转染正义或反义加或下调其在细胞内水平,研究其对肺癌细胞表达/—一跋欤进一步揭示其调控凋亡的分子机制,为治疗肺癌提供新的途径。舌
材料与方法⒉牧嫌胧约⑹笛榉椒人肺腺癌细胞、跣。成熟序列:正义反义舌騧一正义’一反义’一乱序每个碱基都进行了籓甲基化修饰以保持蛄械奈榷ㄐ裕抻ü獗昙恰细胞培养:%胎牛血清的,和琔培养,℃、サ腃骸禾崛∠赴躌,根据约梁泻按说明书操作。所有反应均设置三个复孔。瞬时转染:培养细胞至亚融合状态,转染正义或反义一/和乱序组溶液混合液加入到孔板中。℃、L跫屡嘌—∈焙蠼嘌灰海菪枰E嘌∈薄—禾崛∠赴躌,按试剂盒方法进行反应。锴碇悄旱缬窘屑觳猓捎媚撼上穹治鱿低辰邪攵糠治觥:采用考马斯亮蓝法进行蛋白定量,陨ā实验结果经凝胶成像系统采集,进行灰度值测定,猘为内对照,重复三次。流式细胞术双染法好恐窒赴H竞蠓殖伤淖椋嚎瞻对照组、加椤⒓覨楹图覣组。在疦:珹狹一/,籄’;籊一
继木⑼臣蒲Х治⒆H菊寤蚍匆錷一一/对细胞中表达水平和凋亡影响⒄寤蚍匆錷一一/对细胞表达、野生型—虰一挠跋上检测细胞凋亡情况。,用±表示,S型臣蒲б庖濉在细胞中分别转染乱寤蚍匆錷一一/,用乱序组和空转染组作对照,转染螅肦猼椒ḿ觳鈓一一/表达水平、用流式细胞术检测细胞凋亡。结果显示:转染正义/组细胞中泶锼胶拖赴蛲雎示嚷倚蜃楹涂兆H咀槊飨栽龈;转染反义疭橄赴衜一一/表达水平和细胞凋亡率均篒二舌蜃楹涂兆H咀槊飨越档;乱序组和空转组与未处理组相比,泶锼胶拖赴蛲雎示廾飨员浠。在细胞中分别转染正义或反义一/螅ü齊狿和方法检测、野生型和萴偷鞍妆泶锴况。结果显示