文档介绍：河北医科大学
硕士学位论文
CpG寡核苷酸增强UPEC FimH疫苗粘膜免疫应答的实验研究
姓名:李博
申请学位级别:硕士
专业:免疫学
指导教师:尹晓琳
20090301
押塑账嵩銮縐疫苗粘膜免疫应答的实验研究摘要目的:尿路感染,橇俅上的常见病、多发病,其主要致病菌为尿路致病性大肠杆菌型菌毛亚单位,能识别宿主上皮细胞特异受体氨基多糖聚糖或糖氨基糖甙等,介导细菌粘附并侵入宿主细胞而致病。另外,蛋白还能够直接与细胞表面的结合诱导固有性免疫反应。以前的研究表明,蛋白和质粒全身免疫后能有效诱导血清中特异性嗫固宓牟虻乐水平很低,但在对抗粘膜感染的抗体反应中更为重要。粘膜免疫在防御细菌、病毒等病原体引起的肠道及呼吸道感染中起主要作用,是机体免疫防御的第一道屏障。粘膜免疫可以诱导局部粘膜产生、保护性抗体,并可诱导其他部位的粘膜也产生。由于粘膜表面特殊的理化性质使粘膜应答的强度减弱,因此需要应用免疫佐剂使少量的抗原诱导机体产生早期、高效且持久的免疫应答。作为一种新型佐剂,可被宿主天然免疫细胞的上的模式识别受体识别,主要是样受体盏枷嘤ο胞活化。如它能激活树突状细胞、单核细胞、巨噬细胞等,中文摘要,荱押塑账分泌瓹、耵师一、Q镜认赴蜃印A硗猓珻,
.质粒组、第镃方法:姓衬ぷ艏粱钚约肮惴旱拿庖叩鹘诨钚裕且恢指咝型的粘膜佐剂,可诱导产生兔庖哂Υ稹W魑P滦驼衬导全面的系统和粘膜免疫应答方面具有诸多优势。本研究旨在将构建好的的真核表达质粒和原核表达蛋白制备和提纯后,与胁煌楹厦庖咝∈螅鄄不同组的小鼠产生的免疫反应及訤呙绲拿庖咴强作用及其对小鼠粘膜感染的免疫保护作用。柿5奶崛⒓ḿ暗鞍椎拇炕禾崛≌婧吮泶镏柿序,酶切鉴定正确;⒛蛩嘏ǘ忍荻却炕⒍浚锩庖撸航票傅腇柿!质粒、蛋白经滴鼻免疫/∈螅组空白对照组稳天:每次免疫前内眦取血收集血清并收集尿液;中抗蛋白特异性蛞杭把G逯衧的效价测定:ú舛尿液中的和外周血中的粤魇较赴遣饬苛馨拖赴蠧侨旱陌俜佐剂,谠銮靠乖庖弑;ぷ饔谩捅鹱;弧⒂.甪⒃吮泶镏柿虲基受态瓹琁盏急泶锏鞍譌琒—、、第镻柿W椤⒌阪拮一,蛋白组、第镃组、第蛋白组,每组只,每只危裁庖咚拇危涓G逯刑匾煨訧的效价测定:ú舛ㄍ庵苎中文摘要一
ザ竞蟀螂字芯浼剖耗┐蚊庖吆欤羧⊙清及尿液,用大肠杆菌甓孕∈笮芯虻腊螂坠ザ荆个/,自小鼠尿道口注入山菌液/只。攻毒后天处死小鼠,将膀胱悬液稀释后涂布于伊红美兰平板培养基上,℃温箱孵育小时,进行菌落计数。ü馐凳倍縋检测膀胱组织细胞因子的表达量:攻毒后小鼠膀胱组织提取苑醋后为模板,沟囊铮惺凳倍縋。结果:礁銎危砻髦柿9菇ㄕ贰D蛩嘏ǘ忍荻确ù炕出以包涵体形式表达的融合蛋白。钦衬っ庖咝∈螅笛樽檠G逯芯觳獬隹梗瓼特异珻柿W榈淖罡咝Ъ鄞锏:,白组的最高效价达到鞍酌庖弑戎柿C疫、:,:厦庖组较高;ü舛縋显示,:厦庖咦榘螂鬃橹细胞因子甕的表达量比单纯组显著升高ザ竞蟀螂字芯浼剖允荆ゴ縁柿:虵蛋白免疫组膀胱中的菌落数明显低于蚉免疫组比含量;量为婧吮泶镏柿.、、. 、
结论:关键词:荒蚵分虏⌒源蟪Ω司籌型菌毛;.,不能诱导较好的细胞免疫应答。而庖呒饶苡盏继逡好庖哂帜苡盏枷赴庖摺茉黾覨柿:虵鞍椎拿庖咴裕偷鞍椎奶逡好庖吆驼衬っ庖咦饔迷銮浚ǘ韵赴庖作用无明显增强。,而芄辉銮科浔;ぷ饔谩质粒;蛋白;粘膜佐剂且里中文摘要、
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