文档介绍：苏州大学
博士学位论文
FEZ1在星形胶质细胞中的表达及其功能研究
姓名:何江虹
申请学位级别:博士
专业:人体解剖与组织胚胎学
指导教师:夏春林
20090501
在星形胶质细胞中的表达及其功能研究中文摘要获得退鸄,免疫荧光双标鉴定;τ肂虮泶锲仔酒星形胶质细胞在中枢神经系统中数量最多、分布最广,在形态、受体的分布及胞质活性物质的含量等方面都存在明显的异质性,不同谱系发生的星形胶质细胞在中枢神经系统中所起的作用至今仍不明确。掷搿⑴嘌竦貌煌紫道丛吹牧叫托切谓褐氏赴蚑ü基因表达谱芯片技术构建星形胶质细胞基因表达谱,进行对比分析,筛选出细胞特异性差异表达基因。踊竦玫幕虮泶锲字校《ㄔ诮褐氏赴行路⑾值闹嵬怀墒脱由煜喙基因,分析在培养的两型星形胶质细胞中的表达定位。治鯢诖笫竽宰橹⒂讨械谋泶锉浠!ü鼺蚩寺。彩弊H炯霸吮泶锓椒ǎ醪教教諪孕切谓质细胞活性及神经元突起生长的影响。方法:第一部分捎谜竦捶ê筒钏偬诜ǎ有律惶霺笫蟠竽云げ惴掷术对比分析在培养的蚑中细胞特异性差异表达基因情况。第二部分冒攵縍和细胞免疫化学的方法检测基因在蚑中的表达及细胞定位情况,验证基因表达谱芯片结果。∩天、臁天、堋个月、鲈碌腟笫螅灌注后取脑进行冰冻切片,并分别以和或对星形胶质细胞和神经元进行免疫荧光双标,检测在脑组织发育过程中的表达定位。第三部分应用方法从大鼠大脑皮层克隆获得全长序列,,瞬时转染星形胶质细胞,ḿ觳庀赴盍Γ醪焦鄄霧蚨孕切谓褐氏赴さ挠跋欤还菇原核表达重组质粒,体外原核表达瓼诤偷鞍祝鄄霧对背根节神经元突起生长的影响。目的:、钾
τ蒙虾2┬腔蛐酒拘切谓褐氏赴虮泶锲仔酒珺四次芯片结果交集显示,在个检测点中,发现差异表达基因酰个为已知基因,其中个在懈弑泶铮鲈赥中高表达。与神经轴突传导相关基因均在斜泶锷系鳎渲行路⑾值挠胫嵬怀墒脱由煜喙氐腇基因在胶质细胞中的表达及作用国内外尚未见相关研究报道。皐结果显示在体外培养的两型星形胶质细胞中水平及蛋白水平均有表达,且在斜泶锩飨栽黾樱牖虮泶锲仔酒结果一致。细胞免疫荧光双标结果显示,蛋白在嫦赴、胞中均有表达,分布于细胞胞浆及突起,在癟中可与共定位,细胞核中没有表达。诖笫竽宰橹崆虻纳毕赴涂帕O赴B沓葑椿氐目帕O赴海马区的锥体细胞,皮层锥体细胞也有表达,嗅球及海马齿状回星形胶质细胞有表达,生后霧泶锪看镒罡摺菇ǖ膒..真核重组质粒和质粒经测序鉴定正确,瞬时转染星形胶质细胞,干扰基因表达可降低细胞活力,抑制细胞生长。菇ǖ膒吮泶镏刈橹柿>庑蚣ㄕ罚贐蟪杆菌中经诱导可表达瓼诤偷鞍祝玫鞍锥源笫蟊掣谕黄鹕び幸欢ù进作用。结论:煌紫道丛吹牧叫托切谓褐氏赴虮泶锲状嬖诿飨圆钜欤渲杏肷窬轴突传导相关基因表达差异提示蚑可能在诱导轴突生长方面有不同功状窝芯恐な担現蛟谔逋馀嘌男切谓褐势紫迪赴芯斜泶铮但在斜泶锩飨栽黾印诖笫竽宰橹⒂讨行崆颉⒑B砩窬<靶切谓褐氏赴杏斜达。、质粒以及原核表达重组质粒,为进一步研究对星形胶质细胞生物学特性的影响及在其中枢神经系统中的作用机制等奠定了实验基础。结果:能。在星形胶质细胞中的表达及其功能研究中文摘要。
关键词:星形胶质细胞,,基因表达谱,脑发育,真核转染,原核表达作者:何江虹指导教师:夏春林教授在星形胶质细胞中的表达及其功能研究中文摘要
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弛期:弩幽研究生签名:圣雪三丝日期:兰竺望:兰:研究生签名:缅:<啻匀苏州大学学位论文独创性声明及使用授权声明期:.苎咝:￡:本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不含为获得苏州大学或其它教育机构