文档介绍：浙江大学
硕士学位论文
小鲵科线粒体基因的序列分析及其分子系统学研究
姓名:李悦
申请学位级别:硕士
专业:遗传学
指导教师:吴敏;方盛国
20040501
小鲵科线粒体基因的序列分析及其分子系统学研究摘要的现存动物。它对研究生物的进化有着重要科研价值。小鲵科是有尾目中最原始的一个类群,在有尾类研究中处于重要地位。本文根据两栖类动物线粒体两端的特征序列确定编码区所在位置,设计特异应用抗生素筛选法随机挑取阳性克隆进行觳狻<ㄑ粜钥寺『蠖灾刈橹柿=对同源序列进行排列,并经人工仔细核查。在此基础上,序列输入软件包胶电泳结果中显示出清晰的特异性扩增条带,经连接及转化实验,在固体培养关键词:小鲵科:核糖体:细胞色素悍肿酉低逞有尾两栖类是现存最低等的陆生脊椎动物,是她球上由水生转向陆生较原始性引物采用际醮有■蚩苹蜃镈中扩增出线粒体基因细胞色素部分编码序列,扩增产物经过%的琼脂糖凝胶电泳、纯化、回收后转化,再行测序。测序结果采用砑中的程序中计算不同序列间的变异位点、筒约信息位点数、颠换百分比、转换/颠换比率和两两序列的遗传距离:用软件基于籶距离采用邻近法狫。构建分子系统树,同时也用软件包,褂肏功能搜寻最大简约法实验结果显示线粒体基因细胞色素基因┰銎卧谇碇悄基上长出较多阳性克隆。随机挑菌进行觳猓浣峁晕Q粜钥寺 K得鞒晒克隆出新疆北鲵和秦巴北鲵的线粒体基因细胞色素部分编码序列,并将其重组入原核表达载体。=峁砻魃较v颉⑽薨呱较v颉⒈狈山溪鲵是三个有效种;巴鲵是有效属且与秦巴北鲵的亲缘关系比较近;黄斑拟小本实验结果为深入开展小鲵科的分子系统学研究奠定了分子水平上的基础。和最大拟然法南低持亟ā软件包的不同方法狫、鲵不是秦巴北鲵的同物异名。
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第一部分文献综述类的起源、早期演化和迁徙提供重要的信息。现生有尾类共计有种。小常重要。对生物演化的研究早期主要集中在形态学方面,即对化石和现存物种的很大的困难。现代分子生物学的迅速发展,使得利用生物分子结构的比较研究来供了新的途径。终生栖息于陆地上。有尾两栖类是现生的三大类两栖动物中的一个重要门类硗两大类是无足类和无尾类R蛭S形怖嗟男翁卣饔胛拮憷嗪臀尬怖嘞啾仁墙仙特化的,更接近现代两栖类的祖先类型,所以有尾类的研究可以对探讨现代两栖生物演化一直是生物学和地质学研究的热点问题,研究关键是生物的起源时间和系统演化关系,对于我们探讨地质史上生物活动和其生存环境的相互关系非外在形态及解剖学研究。但很多物种的化石记录并不完整,许多生物的形态特征差异不显著,或形态差异的可塑性很大,给研究各生物门类的起源和进化带来了推测生物的起源及系统演化成为可能,不但填补了化石记录的空白,弥补了形态学研究的不足,还可以与传统方法得出的结论相互验证,为认识生物演化历程提在脊椎动物中,两栖动物是最早由水生环境登上复杂多变的陆地环境生活的脊椎动物,是由水生的鱼类进化到陆生羊膜动物的过渡类型。它们不仅占有了水生态领域,丽且开拓了一个全新的陆地生态领域。两栖动物中,有尾目隙嘁赖于水,该目多数种类终生栖息于水中;有的种类成体离水,栖于湿地;有些种类鲵科是有尾目中最原始的一个类群,在有尾类研究中处于重要地位。对有尾两栖类小鲵科的演化、在亚洲的分布及分异进行研究,对世界有尾两栖类的研究也提供了一个重要的素材。蛭
.较v蚴屁加捎,￡,:无斑山溪鲵、龙洞山溪鲵、山溪鲵、一、小鲵科各属介绍:各属特征、分布及生物学:.■蚴肋们菷喊布P■颉⒅泄■颉⑻ㄍ逍■颉⒍ū毙肥鲵属鯿砂砂“口、北鲵属哂丁H缧和极北鲵属爻χ載月咖”5属伎诨た赾“间、小鲵属桑琀、巴鲵属蟜“、爪鲵属砂鯿叫甜小鲵科。琻出有嘀郑饕7植加诙牵笨傻奖奔Γ到伊朗,我国种类特别丰富“、。小鲵科成员体型很小,身长不超过厘米。小鲵科依生活方式的不同可分为两大类群,一类为陆栖,包括小鲵、极北鲵、爪鲵等,腲争议较大”⋯。著或弱;舌长椭圆形:颈褶和肋沟不甚显著;指;掌、蠊部有或无角质鞘。生活于林间潮湿的地面,仅在繁殖栖回到溪流中;另~类为水栖。包括北鲵、山溪鲵等,多生活在寒冷山溪中,不远离水源。根据赵尔宓、张学文、赵蕙、鹰岩中国两栖纲和爬行纲动物校正名录将我国小鲵科分为鍪簦直鹞I较v是对于其中的~些种是否能独立为有效属以及是否为同物异名,分类学家一直持有异议。特别是对山溪鲵属、巴鲵属、北鲵属以及是否存在拟小鲵属北方山溪鲵、盐源山溪鲵、太白山溪鲵。