文档介绍：华中科技大学
博士学位论文
结核性与恶性胸腔积液内活性IL-16水平的改变及其机制
姓名:田莉
申请学位级别:博士
专业:免疫学
指导教师:龚非力;谭政
2011-05
中文摘要
结核性与恶性胸腔积液内活性 IL-16 水平的改变及其机制
博士研究生:田莉
导师:龚非力教授
谭政老师
华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系
IL-16最初作为CD4分子的配体而被发现,其可趋化所有CD4+细胞,尤其是
CD4+T细胞。IL-16在不同的病理过程中发挥不同的作用,在有些疾病中是趋化
因子,在有些疾病中为促炎症因子,在其他疾病中还可能作为抑制因子发挥作用。
一、结核性胸腔积液(TBPE)内活性IL-16水平增高
前期研究发现:结核性胸腔积液(TBPE)和恶性胸腔积液(MPE)中均含
高水平IL-16,且 TBPE内活性IL-16水平明显高于MPE。本文借助ELISA检测胸水
上清活性IL-16水平,结果显示:与MPE相比,TBPE内活性IL-16水平增高。此
结果提示,结核性胸水内活性IL-16来源可能与恶性胸水内活性IL-16来源不同,
或二者IL-16的来源(产生细胞)相同,但表达水平各异。
二、胸腔积液内活性IL-16的细胞来源
正常情况下,IL-16 前体蛋白组成性表达于各种免疫细胞和非免疫细胞内。
文献已报道:与恶性胸水相比,结核性胸水淋巴细胞中 CD4+T 细胞数量及比例
均明显升高,而 CD8+T 细胞比例降低。为探讨 TBPE 内 IL-16 水平升高是否由
于 CD4+T 细胞数量增加所致,借助流式细胞术检测两种胸腔积液中 T 细胞亚群
(CD3+CD8+T 细胞和 CD3+CD8-T 细胞)和 B 细胞胞内 IL-16(包括 IL-16 前体)
表达。
细胞和 B 细胞组成性表达 IL-16
流式细胞术检测结核病和肿瘤患者外周血、胸腔积液 T/B 细胞中 IL-16+细胞
比例。结果显示,两组患者外周血和胸水内几乎全部 T 细胞(包括 CD3+CD8-
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和 CD3+CD8+T 细胞)均组成性表达 IL-16(包括 IL-16 前体蛋白),绝大多数 B
细胞也表达 IL-16。
-16+细胞中 CD3+CD8-T 细胞占绝对优势
进一步分析 IL-16+细胞中淋巴细胞亚群比例(包括 T 细胞和 B 细胞)。结果
表明,两组患者外周血和胸水内 IL-16+(包括 IL-16 前体蛋白)单个核细胞中,
CD3+CD8-T 细胞占绝对优势,其次是 CD3+CD8+T 细胞。
3. T 细胞内 IL-16 表达水平(平均荧光强度 MFI)高于 B 细胞
两组患者胸腔积液 IL-16+T 细胞(包括 CD3+CD8+IL-16+T 细胞和
CD3+CD8-IL-16+T 细胞)内 IL-16 表达水平(MFI)明显高于 IL-16+B 细胞。
两组患者外周血 CD3+CD8-IL-16+T 细胞 IL-16 表达水平(MFI)显著高于
IL-16+B 细胞。
结论:就单个细胞而言,T 细胞内 IL-16 表达水平较高。
和 MPE 内 CD4+T 和 CD8+T 细胞 IL-16 分泌水平存在差异
ELISA 检测结果显示:结核性胸水来源的 CD4+T 细胞培养上清活性 IL-16
水平(± ng/L)明显低于 CD8+T 细胞培养上清活性 IL-16 水平(377±
ng/L);恶性胸水来源 CD4+T 细胞培养上清活性 IL-16 水平(± ng/L)
显著高于 CD8+T 细胞培养上清活性 IL-16 水平(± ng/L)。
三、对结核性胸腔积液内 IL-16 水平增高的初步机制研究
胸水 CD4+T 细胞和 CD8+T 细胞胞内 IL-16 蛋白表达水平无明显差异,但两
类细胞所分泌活性 IL-16 水平有明显差异。作者猜测,上述 IL-16 分泌水平的差
异可能与细胞内 Caspase-3 活化相关。文献已报道,活化的 Caspase-3 在 IL-16
前体剪切和活性 IL-16 分泌中发挥重要作用。活化的 Caspase-3 可剪切 IL-16 前
体蛋白,所产生的羧基端 121 个氨基酸肽段可被分泌至细胞外,此肽段即活性
IL-16 。本文借助流式细胞术检测结核性及肿瘤 PB 和 PE 中
CD3+CD8-/CD3+CD8+T 细胞内 Caspase-3 活化水平,结果发现:结核性胸腔积液
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