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阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7表达KIF4A的抑制作用.pdf

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阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7表达KIF4A的抑制作用.pdf

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阿霉素对人乳腺癌细胞MCF-7表达KIF4A的抑制作用.pdf

文档介绍

文档介绍:隶劫大·粤。硕士学位论文阿霉素对人乳腺癌细胞表达的抑制作用导师姓名:沈传陆研究生姓名:王露
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日期:逆迦:鱼:±互睡五蓬东南大学学位论文使用授权声明东南大学学位论文独创性声明妇望本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得东南大学或其它教育机构的学位而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:日期:东南大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆有权保留本人说送交学位论文的复印件和电子文档,可以采用影印、缩目蚱渌粗剖侄伪4媛畚摹本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外,允许论文被查阅和借阅,可以公布ㄒ缘缱有畔⑿问娇论文的全部内容或中、英文摘要等部分内容。论文的公布ㄒ缘缱有畔⑿问娇授权东南大学研究生院办理。导师签名:
目录目录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯主要英文缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第一章文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯阿霉素对人乳腺癌细胞泶颣的抑制作用笛椴牧稀笛榉椒ā第三章实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯¨⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第四章讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..第五章结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯附录逊⒈砦恼⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯”致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.作者简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第二章刖舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘
中文摘要阿霉素对人乳腺癌细胞表达囊种谱饔小盹对照不处理,后换以%胎牛血清的于℃、继续培方法:结果:目的:用┰鯧基因完整开放读码框架⒔:王露导师:沈传陆教授是家族中一员,是一类以氨基末端为驱动结构域的驱动蛋白。⋯阿霉素是治疗乳腺癌常用的有效化疗药物之一。低剂量的阿霉素常常诱导肿瘤细胞衰老,这有助于降低药物的多药耐药窒蟆L教諯在阿霉素处理的人乳腺癌细胞表达的变化,有助于进一步阐明墓δ芗捌与阿霉素诱导的肿瘤衰老的关系。接种细胞于培养皿,次胠畉以的阿霉素处理细胞∈保对照不处理,后换以%胎牛血清的于℃、继续培养细胞。分别于阿霉素处理后第、、、、小时,用裂解缓冲液裂解细胞收集蛋白,用方法测定蛋白浓度,取等量蛋白进行检测。用抗固寮觳釱,用⒐艿鞍鬃魑I涎哉软件进行光密度分析,之后将各蛋白条带的光密度值用于下列公式计算Ⅺ鞍妆泶镆种坡剩鞍妆泶镆种坡%/.,次同分别用.、、、的阿霉素处理细胞∈保蠡灰ヌヅQG宓腄妗继续培养细胞。于阿霉素处理后第小时取出培养皿,收集蛋白,行蛋白浓度测定,取等量蛋白行软件进行光密度分析,并且计算鞍妆泶镆种坡省接,。一小时后,用阿霉素处理,而后置于荧光显微镜下观察表达及分布。接种适量的细胞于培养皿,次日用·陌⒚顾卮硐赴养细胞。于阿霉素处理后第小时,取出培养皿,行衰老相关半乳糖苷酶染色,次日于倒置显微镜下观察衰老细胞,计算衰老染色率旧粜韵赴剖总细胞数阿霉素处理后不同时间段收集蛋白行检测结果分析发现,在处理后第、和⒚顾厮淇梢种芀蛋白表达,但其抑制作用并不十分明显,鞍子隓一微管蛋白光密度比值分析显示,其表达的抑制率仅介=。用甈·一¨.
关键词:结论:于%~%之间;而在和⒚顾卮淼腗一赴泶颣显著降低,其表达的抑制率均高达%以上,其中,尤以蠲飨浴用不同浓度的阿霉素处理细胞,笫占鞍仔蠾检测结果分析发现,虽然·韵屡ǘ鹊陌⒚顾囟訩蛋白表达无明显·约耙陨吓ǘ鹊陌⒚顾鼐上灾档蚄蛋白水平,蛋白与⒐艿鞍坠饷芏缺戎捣治鱿允酒浔泶锏囊种坡示叽ヒ陨希⑶呈浓度依赖性。甂质粒构建成功,将其转染入细胞高表达下观察带有绿色荧光的鞍字饕7植荚谙赴耍试残位蛲衷残危巳未见分布。用阿霉素处理之后,其分布未见改变。与未用阿霉素处理的细胞相比,用·的阿霉素处理∈的细胞的衰老相关半乳糖苷酶染色率由ヌ岣叩ィ赴酥鼙叱现蓝染区域,细胞呈衰老样变:体积变大,扁平,胞浆颗粒增多,富含液泡。

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