文档介绍：柱层析技术
常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相
的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望
能有所帮助。
柱子可以分为：加压，常压，减压。
压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所
以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分
离，一个柱子几个月也是有的。
减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过
硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝聚），以及有些比较易分解的东西可能得
不到，而且还必须同时使用水泵抽气（很大的噪音，而且时间长）。以前曾经大量的过
减压柱，对它有比较深厚的感情，但是自从尝试了加压后，就几乎再也没动过减压的念
头了。
加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。压力
的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵（给鱼缸供气的就行）。非凡是在轻易分解
的样品的分离中适用。压力不可过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。个人觉得
加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。
关于柱子的尺寸，应该是粗长的最好。
柱子长了，相应的塔板数就高。柱子粗了，上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是
样品层比较薄），这样相对的减小了分离的难度。试想假如柱子十厘米，而样品就有二
厘米，那么分离的难度可想而知，恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。而假如样品层只
，那么各组分就比较轻易得到完全分离了。当然采用粗大的柱子要牺牲比较多
的硅胶和溶剂了，不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了（有些不环保的说，
不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费）。
现在见到的柱子径高比一般在1：5～10，书中写硅胶量是样品量的30～40倍，具体的选
择要具体分析。假如所需组分和杂质分的比较开（～，杂质
），就可以少用硅胶，用小柱子（例如200毫克的样品，用
2cm×20cm的柱子
）；，就要加大柱子，我觉得可以增加柱子的直径，比如用3cm的，也
可以减小淋洗剂的极性等等。
关于无水无氧柱，适用于对氧，水敏感，易分解的产品。
可以湿柱，也可以干柱。不过在样品之前至少要用溶剂把柱子饱和一次，因为溶剂和硅
胶饱和时放出的热量有可能是产品分解，究竟要分离的是敏感的东东，小心不为过。也
是因为分离的东西比较敏感，所以接收瓶一定要用可密封的，遵循schlenk操作。至于是
加压、常压、减压，随需而定。因为是schlenk操作，所以点板是个问题，假如样品是显
色的，恭喜了，不用点板，直接看柱子上的色带就行了。假如样品无色，只好预备几十
个schlenk瓶，一瓶一瓶的点，不过几次之后就知道样品在哪，也就可以省些了。像我以
前过一根无水无氧柱，需要六个schlenk，现在只一个就能把所要的全收集到。
无水无氧柱中用的比较多的是用氧化铝作固定相。因为硅胶中有大量的羟基裸露在外，
很轻易是样品分解，非凡是金属有机化合物和含磷化合物。而氧化铝可以做成碱性、中
性和酸性的，选择余地比较大，但是比硅胶要贵些。
听说有个方法，就是用石英做柱子，然后用HF254做固定相，这样在柱子外面用紫外灯一
照就知道产品在哪里了，没有验证过。哪位做过可以提出来大家参详参详。
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※ 关于湿法、干法上样。
湿法省事，一般用淋洗剂溶解样品，也可以用二***甲烷、乙酸乙酯等，但溶剂越少越好
，不然溶剂就成了淋洗剂了。
很多样品在上柱前是粘乎乎的，一般没关系。可是有的上样后在硅胶上又会析出，这一
般都是比较大量的样品才会出现，是因为硅胶对样品的吸附饱和，而样品本身又是比较
好的固体才会发生，这就应该先重结晶，得到大部分的产品后再柱分，假如不能重结晶
那就不管它了，直接过就是了，样品随着淋洗剂流动会溶解的。
有些样品溶解性差，能溶解的溶剂又不能上柱（比如DMF,DMSO等，会随着溶剂一起走，
显色是一个很长的脱尾），这时就必须用干法上柱了。样品和硅胶的量有一种说法是1：
1，我觉得是越少越好，但是要保证在旋干后，不能看到明显的固体颗粒（那说明有的样
品没有吸附在硅胶上）。
溶剂的选择。
当然是最便宜，最安全，最环保的了。所以大多选用石油醚，乙酸乙酯。文献中有写用
正己烷的，太贵了，除非非凡需要不要用不然银子哗哗的，流的比淋洗剂还快，不过因
为极性很小，有时还是非它不可。***也可以用，但是就