文档介绍：上海交通大学
硕士学位论文
谷氨酸和花生四烯酸对星形胶质细胞损伤的研究
姓名:徐振宇
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:童耕雷;于常海
20050101
附件四
上海交通大学
学位论文原创性声明
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独立进行研究工作所取得的成果除文中已经注明引用的内容外
本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果
对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式
标明本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担
学位论文作者签名徐振宇
日期 2005 年 1 月 10 日
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附件五
上海交通大学
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不保密
请在以上方框内打
学位论文作者签名徐振宇指导教师签名童耕雷
日期年月日日期年月日
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ABBREVIATION:
TBS-T---tris buffered saline-tween 20; HRP---horseradish peroxidase; FBS---fetal
bovine serum; PBS---phosphate buffered saline; RT-PCR---reverse transcription-
polymerase chain reaction; AFM---atomic force microscopy; SPM---scanning probe
microscope MDA--- Malondialdehyde TAE---tris acetate etraacetic
acid; PMSF---phenylmethysulfonyl fluoride; LDH--- lactate dehydrogenase; bcl-2---B
cell lymphoma-2; hsp70---heat shock protein 70; BBB---blood brain barrier; CNS---
central nervous system; DEPC---Diethyl pyrocarbonate; dNTPs---Deoxynucleotides;
BSA---bovine serum; RMS---Root Mean Square; SDS-PAGE--- Sodium
Dodecylulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis;
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谷氨酸和花生四烯酸协同地损伤星形胶质细胞
一摘要
在细胞受到损伤时所发生的一系列反应中许多内源性毒素同
时从受伤的细胞中释放出来并进一步加重细胞损伤造成二次损伤
为了能更好地阐明损伤机制许多毒素都被单独研究但是对这些
毒素研究所得出的结论只能被认为是很好的参考而不能真正的反应
在病理和生理条件下的多因素情况我们选择两种常见的试剂谷氨
酸(1mM)和花生四烯酸()来模拟病理条件下细胞的损伤机
制这不仅因为已知这两种物质在细胞损伤时会同时得到释放而
且人们已经对这两种物质分别做了大量细致深入的研究通过对乳
酸脱氢酶活性细胞蛋白含量的测量和细胞内水体积的测量我们
发现谷氨酸和花生四烯酸能协同地诱导细胞发生退行性病变同时
在基因水平上我们还发现这两种物质能协同地降低与凋亡相关基因
bcl-2 和 hsp70 mRNA 的含量同样在蛋白水平上 bcl-2 和 hsp70
蛋白的表达量也协同地降低我们利用 Hoechst 染色和 AFM 两项技
术同时表明了细胞核在这两种物质的作用下发生萎缩但是仅用其
中的任何一种都不能使细胞核发生萎缩利用 AFM 技术我们观察
到花生四烯酸会在细胞膜表面形成一个个洞而谷氨酸则可以使细
胞核发生肿胀并使细胞膜变得粗糙基于以上的实验结果我们分
别在生化基因表达蛋白表达和形态学水平上证明了花生四烯酸
和谷氨酸能协同地损伤星形胶质细胞本论文通过实验对于以往仅
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仅通过一种药物对细胞的作用来模拟真实的病理情况这样一种观点
提出了质疑进而本论文提倡在未来的疾病治疗中我们应该积极
考虑采用鸡尾酒疗法即多种药物的混合治疗
关键词bcl2, hsp70,细胞损伤核肿胀协同效应
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GLUTAMATE A