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胚胎干细胞分离培养及定向分化研究.pdf

上传人:1322891254 2014/6/21 文件大小:0 KB

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胚胎干细胞分离培养及定向分化研究.pdf

文档介绍

文档介绍:中文摘要此后大约每天传代一次。其间对此类细胞集落的检测证实了其胚胎干领域。年,美国的两个科学家小组分别从人体外受精发育而成的囊胚内细类生殖嵴干细胞系。干细胞的发现为研究细胞分化、动物发育、建立相关研究模型、阐明基因功能等开辟了广阔的空间。本实验也在人类胚胎生殖嵴干细胞、小原始生殖嵴部位分离到原始生殖细胞,经过机械和化学方法的解离后培养于事先验中,几个适龄的胚胎的原代培养物中都出现了鸟巢状的细胞集落,维持时间最长的一个胚胎细胞株在传代培养了笕匀豢梢怨鄄斓紼赴洹碱性磷酸酶钚约觳饨峁な盗苏庑┫赴淙肥稻哂性忌翅崭上实验二是关于小鼠胚胎干细胞的分离培养。从怀孕天的小鼠子宫中取出养层上。囊胚一般在小时后贴壁并脱去透明带,由囊胚中的内细胞团增殖形成一个胚胎干细胞球,待其生长至一定程度后对其进行酶解传代。在传代后的细胞中重新生成集落形态的细胞集落,在集落生长至一定程度后再进行传代,细胞特性。本实验中的小鼠胚胎细胞再传至第九代后逐渐消失。实验三首先建立了一个小鼠胚胎干细胞定向分化成心肌细胞的实验平台,然后采用了中募〖膊∠喙氐囊┪铮夯栖簧鲆,姿峁呛虷代号在此定向分化的实验平台上进行了一系列浓度的药物筛选,实验采用视黄酸和关键词:胚胎干细胞,胚胎生殖系干细胞,细胞培养,心肌。定向分化自年首个胚胎干细胞建系以来,世界各国的科学家纷纷投身到该研究胞团和周龄流产的胚胎原始生殖嵴中,成功获得了人类胚胎干细胞系和人鼠胚胎干细胞的分离培养,以及小鼠胚胎干细胞的定向分化等方面进行了研究。实验一是有关人类胚胎生殖嵴干细胞的分离培养。从周的流产胎儿的用丝裂霉素处理过的小鼠胚胎成纤维细胞或人胚胎成纤维细胞饲养层上,培养基中添加了琤現认赴蜃樱撕蟠笤济天左右传代一次。在实胞的特性。发育至囊胚期的受精卵,培养于事先用丝裂霉素处理过的小鼠胚胎成纤维细胞饲的混合诱导剂作为阳性对照。其中药物在适当的浓度下对胚胎干细胞定向发育成心肌细胞表现出强烈的诱导作用%浙江大学硕士学位论文
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胚胎干细胞的研究进展及应用前景第一部分文献综述
,细胞系唤ⅰ辏琓和啪氖笛槭曳直鹩肌自年英国科学家蚄从小鼠胚泡中分离建立了胚胎干细猪、鸡、恒河猴和绒猴等的胚胎干细胞,为研究细胞分化、动物发育、建立相关研究模型、阐明基因功能等开辟了广阔的空间。年,美国蚃笱У腡和确直鸫尤颂逋馐芫ǚ⒂傻哪遗吣谙赴团和周龄流产的胚胎生殖嵴细胞中,成功获得了人类胚胎干细胞系和人类生殖嵴干细胞系,到目前为止,该细胞系已经传了多代,细室相继成功地培养出了和细胞系,迄今在美国⒉岬娜死嗯咛セ生殖嵴细胞系已有几十株。年,研究人员又发现即使是成熟的干细胞也可望,同时也促使人们重新思考传统的细胞发育概念。正是由于干细胞的研究获得干细胞建系研究概况从年代初期至今,已经有多种哺乳动物,包括非人灵长类动物的胚胎干胑,细胞系停蚺咛ド诚赴人类的胚泡和早期胚胎的生殖嵴培养出,细胞系,文章一经发表立即引起全世界的关注,.同时也掀起了一场有政府和社会各界参与的伦理学讨论:能否用人类胚胎作为实验材料钡辏珺等人发现成熟组织中的干细胞在特定微环境下具有向其他组织类型细胞分化的潜力后,这场风波才’被逐渐平息。基于早期胚胎学家的观测结果,:在成熟的组织中,即使存在干细胞,其分化能力胞系以来,对干细胞的研究引起了科学界的高度重视,世界各国生物学和医学界的科学家纷纷投身到该领域的研究,己先后分离得到了各种动物如金黄地鼠、貂、胞可以保持不分化状态,己成为可以长期培养的“不朽”细胞系,而细胞在文章发表时已传了代,其后又传到了多代,但目前还不能确定其是否已成为可以永久传代的细胞系。两株细胞系都能在免疫缺陷型小鼠中形成具三个胚层的拟胚体,证明两者均有多分化潜能。在其后的几年中,世界上许多国家的实验以被分化为不同类型的细胞。干细胞的研究进展给医学应用领域带来了新的希了突破性进展,使得有关干细胞的研究被牢甓仁罂蒲Ы之首。细胞系浙江大学硕士学位论文
也会受到限制,只能形成其所在组织中少数几种细胞中的一种。难芯成果彻底改变了人们对于干细胞的认识。于是,科研人员将关注的目光由源自胚胎的干细胞转向了成熟组织中的干细胞,希望这些细胞的应用前景可以与胚胎源胚胎干细胞的定义:究竟什么是胚胎干细胞呢飧鑫侍庖丫致哿嗄辍D壳暗墓鄣闳衔#我更新和发育全能性并产生分化后代能力的早期胚胎细胞,它来源于囊胚早期的干细胞的来源与分类成熟组织的缍嗄茉煅8上赴干细胞表上赴姆掷神经元,