文档介绍：高二生物知识点总结选修3
篇一：人教版高中生物选修3知识点总结(详细)
选修3
基因工程的概念
概念：按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
基本原理：让目的基因在受体细胞内稳定且高效的表达
理论基础:DNA是生物遗传物质的发现,DNA双螺旋结构，遗传信息传递方式 核心：构建重组DNA分子
（一）基因工程的基本工具
1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）
（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。
（3） 结果：经限制酶切割产生的DN***段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
注意：用同种限制酶分别切割目的基因和载体从而形成相同的粘性末端，然后用DNA连接酶将目的基因和载体连接起来 ，有时用不同限制酶也可以形成相同的粘性末端，用两种限制酶切割使目的基因和载体两端各形成两种粘性末端，防止载体和目的基因自身环化 2.
“分子缝合针”——DNA连接酶
(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：
①相同点：都缝合磷酸二酯键。
②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DN***段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效
率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:
DN***段的末端，形成磷酸二酯键。
（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点，供外源DN***段插入。
③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
（2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
（3）其它载体：λ噬菌体的衍生物、动植物病毒
(二)基因工程的基本操作程序
第一步：目的基因的获取
： 编码蛋白质的结构基因 。
，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。
（1）PCR的含义：是一项在生物体外复制特定DN***段的核酸合成技术。
（2）目的：获取大量的目的基因
（3）原理：DNA双链复制
（4）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链为单链，断裂氢键；
第二步：冷却到55～60℃，引物与两条单链DNA结合，形成局部双链DNA；
第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶（Taq酶）从引物起始进行互补链的合成。
n（5）特点：指数(2)形式扩增
（6）使用的前提：已知目的基因的一段核苷酸序列
第二步：基因表达载体的构建(核心)
：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因
（1）启动子：是一段有特殊结构的DN***段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。
（2）终止子：也是一段有特殊结构的DN***段 ，位于基因的尾端。
（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。
注意：①载体与表达载体的区别：二者都有标记基因和复制原点两部分DN***段。表达载体在载体基础上增加了目的基因、启动子、终止子三部分结构②用到的工具酶：既用到限制酶切割载体，又用到DNA连接酶将目的基因和载体拼接，两种酶作用的化学键都是磷酸二酯键③启动子、终止子对于目的基因表达必不可少④目的基因不能单独进入受体细胞，必需以表达载体的方式携带进去。
第三步：将目的基因导入受体细胞_
：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
：
将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 农杆菌转化法（农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对大多数单子叶植物没有感染能力。原理：Ti质粒上的T---DNA可以转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体的DNA上）其次还有 基因枪法和 花粉管通道法等。
将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是 显微注射技术。方法的受体细胞多是 受精卵。
将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 ，最常用的原核细胞是 大肠杆菌 ，其转化方法是：先用 Ca2+ 处理细胞，使其成为 感受态细胞 ，再将重组