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学位论文作者:亘孜刃二年石月争目或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。日期:哆稃
~初步检测,有曜;仓暾嫌腥曰ι就庠椿颉摘要人们一直通过施用化学磷肥来补充土壤中磷素,这虽然使作物产量得到大幅度提高,但也随之出现了一系列生态和环境问题,化肥严重,环境恶化,投入效备选的大豆品种有:豫豆、郑、商豆、郑⒅、共经过进一步愈伤诱导发现,这两个品种愈伤生长情况也较好。我们对受体组织并出现了分化,有新鲜输导组织的愈伤作为接穗,嫁接到萌发熳笥摇⑸そ关键词:大豆农杆菌磷高效基因转基因大豆是我国重要的油料作物之一,也是重要的粮饲作物。磷是大豆生长和发育的必需元素,土壤中磷多以固态磷形式存在,植物难以吸收。长期以来,‘率下降等。通过转基因方法提高大豆对磷素的吸收和利用是一条可行的办法。为了得到能够高效吸收利用磷素的大豆转基因新品种,本论文以磷高效吸收利用基因为目的基因,通过根癌农杆菌介导法将基因转入大豆中。目的基因来自水稻基因组,将其与罩棺恿又蟛迦氪启动子的校罅舳雍椭罩棺右黄鹎邢虏迦胫参锔咝П达载錺中,转入根癌农杆菌得到含有目标基因的工程农杆菌。利用本实验筛选的受体基因型,通过秆〉玫昕剐灾仓辏齈分子为提高大豆转化效率,对部分黄淮海地区大豆品种基因型进行筛选。将含有含参锉泶镌靥宓母┡└司员秆〉拇蠖够蛐徒幸传转化,首先对预培养时间和受体组织部位进行试验,通过对共培养三天的子叶节进行旧ǎǜ髌分值淖;剩≡袷室俗魑W;芴宓幕蛐汀品种。研究结果表明,实验的大豆品种豫豆、郑、郑⒅接种培养基后五天裂瓣现象比较严重,我们将预培养时间由传统改进为,有效的减轻了子叶节处木质化现象和子叶裂瓣现象,染色后比较结果表明商豆和/%部位也进行了比较,结果表明,子叶节比胚尖染色效果好。其次,我们利用嫁接技术巧妙的解决了分化成苗时间长和生根困难的问题。选用有完整的生长点壮、两片子叶展开度左右的的豆苗上,减去了传统转基因育种方法中诱导丛生芽、芽伸长和生根的环节,通过嫁接技术,可以将从愈伤到成苗的时间从一个半月缩短到天左右,而且成本低,容易成活。,
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目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.目录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..:.Ⅳ南鬃凼觥大豆转基因研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.大豆磷胁迫研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...土仔财认禄蛩降难芯俊本文研究的目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.参锉泶镌靥宓墓菇ā材料与试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..;!植物表达载体的构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.约梁刑崛≈参颮秂弘................................................................】Ⅳ目录.●
绘〩、肪壤盖蠬购蚿劾┰龌蚱尉胨Πⅰ.阳性克隆的鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.卜辉图冉礜吣完整载体的酶切鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯劾┰龌騈片段⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.蟪Ω司惺芴娜燃ぷ;獭.;覲检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.质粒和贸尧颉双酶切⋯⋯⋯⋯⋯..酶切产物的连接⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.’⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯:.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...植物表达载体转化根癌农杆菌縄⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.笛榱鞒掏肌┰鯫蛄拥絋┰鯪基因连接到⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯盖蠺惺瑉阿⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..靥宓钤尧颉⑵ㄚ罥双酶切⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯和吹牧印和的连接⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..伤琚蟆⒎净篒酶切疦和..表达载体转化农杆菌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.目录....、甤
.秆”昙腔颉农杆菌介导的大豆遗传转化体系的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.虸姒的提取中常见问题⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..<⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..└司榈嫉拇蠖棺右督谝糯;逑档慕ⅰ⋯⋯⋯⋯⋯