大豆抗原蛋白血清抗体间接elisa检测方法的建立-论文.pdf

文档介绍：畜牧 与兽 医 年 第 卷 第 期 · ·
大 豆 抗 原 蛋 白血 清 抗 体 间接
检 测 方 法 的建 立
孙 志阔 ，王希春 ，石念进 ，汪洋 ，
钟 刚，徐 同锏 ，刘芳芳 ，吴金 节
安徽农业大学动物科技学 院，安徽 合肥
摘要 ：旨在建立检测血清大豆抗原蛋白抗体的间接 方法。经琼脂糖凝胶层析纯化大豆抗原蛋白，以不同剂量皮下注射免疫小鼠，采用方
阵滴定法确定最佳抗原包被浓度及血清稀释度 ，并对其他条件进行优化 ，最终建立检测血清大豆抗原蛋 白抗体 的间接 方法 ，利用该方法检
测小 鼠免疫后血清抗体水平 。通过方阵滴定法确定 蛋 白最佳包被浓度 为 ．／，血清稀 释倍数 为 ：；蛋 白抗 原最佳包 被浓度 为
． ／，血清稀释倍数为 ：；两者 的批 内、批 间系数均小于 ％ ，重复性较好 ，通过 法确定 和 蛋 白的最佳免疫次数为
次 ，免疫剂量为 ／。结果表明本试验初步建立大豆抗原蛋 白抗 体检测 间接