文档介绍：广州医学院
硕士学位论文
HIF-1αsiRNA对缺氧诱导肺泡上皮细胞凋亡影响的实验研究
姓名:贺娟
申请学位级别:硕士
专业:儿科学
指导教师:吕回
20070522
眦∞主要英文缩写,%广州医学院硕士论文对缺氧诱导肺泡上皮细胞凋影响的实验研究卯—猙
匀毖跤盏挤闻萆掀は赴蛲影响的实验研究川口中文摘要方法目的醪教教諬—谠谌毖跤盏糃蛲鲋械囊庖澹=徊窖芯啃律毖醴对进行体外干预并评估干扰效果,为防治新生儿肺损广州医学院附属儿童医院研究生:贺娟导师:回教授新生儿急性肺损伤是新生儿时期常见疾病和主要致死原因之一,国内外研究认为缺氧肺损伤的发病机理主要是:缺氧缺血直接导致肺泡上皮细胞及血管内皮细胞水肿、坏死:氧自由基损伤;细胞因子损伤等。近年来有研究认为肺泡上皮细胞凋亡及相关基因表达异常可能是新生儿肺损伤的重要发病机制之一。瑾是细胞对缺氧适应反应的主要转录因子,它在许多细胞事件中起作用,目前认为在缺氧肺泡上皮细胞凋亡中意义重大。研究缺氧肺损伤蛲龅南喙鼗萍凹跎倨涞亡是防治新生儿肺损伤的一个新策略。鄄烊毖跤盏即笫蠓闻萆掀は赴的凋亡变化,研究凋亡在缺氧肺泡上皮细胞损伤中的作用;损伤的发病机制提供实验基础;τ肏—伤提供一个新策略及方向。訡Q芯慷韵螅≡种不同浓度氯化钴饔,采用ḿ觳飧髋ǘ个时点、、、小时赴ひ制率,根据半数抑制浓度筛选出合适剂量建立细胞体外缺氧模型。弥侍褰ü菇êüü庀晕⒕倒鄄煊ü吕对缺氧诱导肺泡上皮细胞凋亡影响的实验研究广州医学院硕十论文
检测各组甀口、蛋白水平变化,结果及方法检测其转染效果,检验口贑挠行浴笛榉治A酱笞椋憾哉兆椋ㄕW楹偷ゴ咳毖踝分别缺氧∈组籋·趕干预组,包括转染后分别缺氧∈弊椤2捎染色荧光显微镜、疨玖魇较赴羌觳飧髯榈蛲霰浠采用透射电子显微镜观察缺氧时凋亡典型形态学变化。捎檬凳庇ü舛縋、结合各组凋亡率,评价种迫毖跤盏糃蛲龅男вΑ煌ǘ菴对的生长抑制率:峁允荆嗤饔檬奔湎拢着ǘ仍黾樱赴ひ种坡试黾樱幌嗤饔门ǘ认拢孀臗作用时间增加,细胞生长抑制率增加;通过描绘生长抑制曲线,我们得出作用半数抑制浓度为疞,在后续的研究中选择疞浓度饔细胞建立体外细胞缺氧模型。ü庀晕⒕迪鹿鄄斓铰躺ü猓H拘ヒ陨希籖结果显示:正常组甜相对含量为±,缺氧趍喽院课..±,较缺氧橄碌瓹模拟缺氧可诱导凋亡:透射电镜检测出凋亡典型形态学变化,缺氧赴鱿痔寤湫。旧手旅芡蹙奂诎耍酥恃睾四つ诓排列等现象;荧光显微镜观察,缺氧出现散在凋亡细胞,凋亡细胞核可见浓染致密的颗粒块状荧光,染色不均匀,正常组、单纯缺氧、组凋亡率分别为:縊.、￡.、..、..,⒌ゴ咳毖组早期凋亡率分别为:、....ゴ咳毖踝橛胝W楸冉系蛲雎视性黾,缺氧小时细胞出现坏死现象。.±%.
结论,单纯缺氧、组Ⅱ蛋白相对含量分别为繭..±、。:繭.、繭.、繭.,与单纯缺氧各组比较分别下调%、%、%稻:干预后缺氧、组鞍紫喽院糠直鹞#.±、、.ü庀晕⒕、组凋亡率分别为罯.、骸.,、樵缙诘蛲雎%直鹞.....,与单纯缺氧各组凋亡率比较明显降低值均.>璓相关分析,ü庀晕⒕ü谂嘌杭尤隒建立了体外毖跄P停捌谑笛楣菇ê玫趕转染至⒛,随缺氧时间延长,细胞凋亡率增加,提示了蛲霾与了缺氧肺损伤的发病机制。、。瓾口梢约跎偃毖跤盏嫉腁凋亡,为下一步在动物体内研究肺损伤的发病机制奠定实验基础,为防治新生儿肺损伤提供一个新策略及方向。关键词缺氧,细胞凋亡,肺泡上皮细胞,小分子干扰琑干扰,缺氧诱导因子广州医学院硕士论文匀毖跤盏挤闻萆掀は赴騬:影响的实验研究瓾—.琍..
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