文档介绍：<<植物生理生化实验>>复习题及答题要点
出题人:陈福龙
一、名词解释:
1、分配层析法:是利用物质在两种不同的混合溶剂中的分配系数不同,而达到分离目的的一种实验方法。在一定条件下,一种物质在某种溶剂系统中的分配系数是一个常数即α=溶质在固定相的浓度(Cs)/溶质在流动相的浓度(Cl)。
2、水势:任一体系水的化学势(μw)和纯水的化学势(μ°w)之差,除以水的偏摩尔体积(VW)所得到的商值,表示为:水势Ψw= (μw—μ°w)/VW=Δμw-/ VW
3、电泳: 是指带电粒子在电场中向与其自身所带电荷相反的电极方向移动的现象。
4、同工酶: 指催化同一种化学反应,但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。
5、荧光现象: 叶绿素提取液在透射光下呈绿色,在反射光下呈暗红色或棕红色的现象。
6、自由基: 共价键均裂产生的具有奇数个电子或不配对电子的原子、原子团、分子或离子。
7、分光光度法:是利用物质对某一波长的光有着很强的光吸收,具有特定的吸收光谱,利用分光光度计来测定其最大光吸收值,通过光吸收值与该物质浓度之间的比例关系来定性、定量测定该物质的一种实验方法。
8、诱导酶: 植物体内本身不含某种酶,当加入特定的诱导物,诱导产生的酶,它的含量在诱导物存在下显著提高,这种诱导物一般是该酶底物本身或底物的类似物。
9、还原糖: 具有自由醛基或酮基的单糖(如葡萄糖、果糖)和某些二糖(如麦芽糖、乳糖等)。
10、电渗现象: 电场中,液体相对于固体支持物的相对移动的现象。
二、问答题:
1、简述纸层析的基本原理?
答:纸层析是以滤纸作为支持物的分配层析法,溶剂系统由有机溶剂和水组成,水和滤纸纤维素有较强的亲和力,因而其扩散作用降低形成固定相;有机溶剂和滤纸亲和力弱,所以滤纸毛细管中自由流动,形成流动相,层析时将滤纸一端进入层析溶剂,有机溶剂连续不断的通过点有样品的原点处,使其中的溶质依据本身的分配系数在两相间进行分配。由于混合液中各种氨基酸的α值不同,其在两相中的分配数量及移动速率(即化移率Rf值)就不同,从而达到分离的目的。移动速率Rf=原点到层析点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离。
2、影响Rf值的主要因素有哪些?
答:(1)物质的极性,物质的极性决定了物质在水和有机溶剂之间的分配情况。
(2)溶质与溶剂间的相互作用,溶质和溶剂之间若能形成氢键,对分配系数的影响很大。
(3)pH值影响主要由pH与分配系数的关系所决定的,溶剂的pH还可以影响流动相的含水量。
(4)滤纸的质地和溶剂的饱和程度。
(5)溶剂的纯度和含水量。
(6)室验室的温度和时间对分配系数也有影响
3、简述不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中存在的三种物理效应?
答:不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中主要存在以下三种物理效应:
(1)电荷效应:酶蛋白按其所带电荷的种类及数量,在电场作用下向一定的电极以一定的速度泳动。
(2)分子筛效应:相对分子质量或构型不同的蛋白质通过一定孔径的分离胶时,所受摩搽不同,受阻程度不同,表现出不同的迁移率。
(3)浓缩效应:待分离样品中的各组分在浓缩胶中被压缩成层,使原来很稀的样品得到高度的浓缩。
4、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中,浓缩效应是如何产生的?
答:原因如下:
(1)由于两层胶的孔径不同,酶蛋白向下移动到两