文档介绍：第六章
肿瘤细胞的培养肿瘤细胞的培养
•肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药
的敏感性、肿瘤细胞和癌分子生物学特
性的重要手段。
•应用体外细胞培养技术进行肿瘤研究具
有许多优点:)
①可免受机体内环境因素的影响,避免了个体差
异性,便于探索各种物理、化和生物因素对肿
瘤细胞生命活动的影响。
②既便于从细胞水平上研究肿瘤细胞的结构与功
能,又便于从基因及分子水平上研究癌变的发
生机理。
③可长期传代、保存,便于观察肿瘤细胞生物学
特性和遗传行为的改变。
④可用于快速筛选抗癌药物和研究耐药机理。
⑤研究周期短,比较经济。但是它也有缺点,如
长期培养可使细胞生物学特性发生改变;体外
实验所得的结果不能完全代表体内的情况,应
与体内试验结合研究更为合理等。
一、肿瘤细胞培养的生物学特性
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•肿瘤细胞形态不规则,细胞界限清晰,伸
展较差,核膜、核仁轮廓明显,核仁多、
核浆丰富。
•折光性强,电镜观察细胞表面微绒毛多而
细密,与肿瘤细胞具不定向运动和铺着不
依赖性有关。

•癌细胞在无血清或低血清(2%~5%)时仍
能生长,营养要求不高,因肿瘤细胞能
自分泌促增殖因子,在软琼脂培养时单
个细胞能形成集落,生长方向性消失,
再加上失去了接触抑制,癌细胞数量增
多时可呈多层重叠生长,细胞饱和密度
大,有丰富的三极有丝分裂,分裂指数
高,细胞倍增周期短。

•永生性也称不死性,在体外培养中表现为可无
限制传代而不凋亡(Apoptosis),体外培养的肿
瘤细胞系(株)都表现有这种特性。
•体外培养的永生性和体内肿瘤的恶性(包括侵润
性)是两种性状,受不同基因调控的,因恶性肿
瘤多数在体外培养时并不那么容易获得成功,
生长增殖能力并不旺盛,有时只能传若干代,
说明体外培养的永生性可在体外培养后获得。
•另外,体外培养的许多细胞系,如NIH3T3、
Rat-1 10T1/2等均具有永生性而无恶性。但两者
有相关性,永生性可能是细胞恶性变的某一阶
段。

•侵润性是肿瘤细胞扩张性增殖行为,体
外培养的肿瘤细胞仍保持有这种特性,
当与正常组织混合培养时,能侵润入其
他正常组织中,甚至能穿透人工隔膜。

•所有肿瘤细胞都是由增殖能力、遗传性、
起源、周期状态等性状不同的细胞组成,
属于异质性,其中有的衰老、退化,有的
处于周期阻滞状态,只有那些处于活跃增
殖的肿瘤干细胞才是支持肿瘤生长的成分
,肿瘤干细胞易于生长增殖,分离培养干
细胞的方法称干细胞培养(有干细胞系和数
个亚系组成)。

•体外培养的肿瘤细胞失去了二倍体核型
,呈异倍体或多倍体,常有标记染色体
出现。正常细胞与恶性肿瘤细胞的区别
,如表8-1-1所示。