文档介绍：利用蛉斯ご丛熘参雄性不育系的研究摘要跪造雄性不育系。实验结果如下:创造雄性不育株,以证明匆錭校菇ǔ苫ㄒ┨匾毂泶锏腡籋直鸲、柿含ǜ婊质粒进行连接,再对重组子进行平板筛选和酶切分析确定一为了证实匆錭艽丛煨坌圆挥颐墙抗性叶片基因枪片,农杆菌片4剐砸镀只鲅渴保∮且恢址肿影槁拢饕9δ苁遣斡胂赴泄氐鞍仔律牡恼鄣⒀腔组装、细胞内运输、蛋白质降解及鹕说男薷矗韵吡L褰峁购凸δ芊⒒重要作用,已有研究证明攵参锏姆⒂忻芮械墓叵担狙芯拷獺正、反义构建成表达载体,并运用基因枪和农杆菌介导法将反义导入烟草,试通过匆錭种苃基因的表达从而坌圆挥泶镌靥宓墓菇人工合成⒎匆錭直鸲ㄏ虿迦氲絧、校到蚿。然后经过平板筛选和酶切分析证明⒎匆錭入到。分别将从回收纯化的⒎匆錭与绒毡层特异表达启动子及罩棺佣ㄏ蛄樱缓蟛迦氲絧、,分别称作柿!NA烁玫囟宰;咏猩秆和检测,用虴和秆”昙腔进行酶切,。竦米;蛐坌圆挥滩质粒用基因枪和农杆菌介导法转化烟草无菌发芽的叶片,共基因枪└司。,得到嫩的叶片进行旧ḿ觳猓株抗性芽中,—蚑
部分不育和昕捎徊挥仓暝谛廴铩⒅旮吆凸抵亓康确矫娑即嬖诿飨缘牟异。石蜡切片分析表明,转基因不育植株的花粉囊的发育和结构与对照的可育植株之间没有任何差异,只是花粉囊中的花粉在不育株中是不育的,而可育株是可育的。由于线粒体和热激蛋白在植物的发育过程中起着重要的作用,为进一步分和方差分析,结果表明:不育植株与对照的线粒体蛋白含量的差异在常温和热激条件下均达到极显著水平.,欢挥仓暝诔N潞腿燃ぬ跫孪;蛑仓甑姆肿蛹觳夂吞镂噬镅Ч鄄将抗性芽长成植株后移栽到大田共得到株转化植株。偷阍咏环治表明,⒎匆錯丫系窖滩莸幕蜃橹小T诮刑锛渖镅性状观察时,株转基因植株中有株表现出完全不育,旮叨炔挥株析其不育机理,我们对花粉线粒体进行了常温和热激处理,提取其蛋白进行测定粒体蛋白含量差异不显著,说明转化株中虻谋泶锸艿揭种疲佣步扰乱了线粒体的功能,最终导致转化株雄性不育,表明匆錯够通过抑制虻谋泶锏贾轮参镄坌圆挥基因枪:农杆菌:匆錯恍坌圆挥性。关键词:烟草;
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弦研究生签名弼研究生签名:冶矿每独创性声明关于论文使用授权的说明C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵●签扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意湖南农业大学可以用不同方式在不同本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得湖南农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明,并表示了谢意。本人完全了解湖南农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。时间:年日/名导师∥.
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第一章文献综述没蚬こ檀丛熘参镄坌圆挥档难芯拷ㄒ┨匾煨员泶锏幕蚣捌淦舳达的基因至少有千种,而在其他营养组织和器官系统的组织中均检测不到其拇嬖凇;ǚ厶匾旎虻谋泶锟稍诩跏至押蠛托℃咦佑兴糠至押蠼小以设想对某些花粉发育过程中关键酶基因进行调控,从而达到雄性不育的目的。利用基因工程技术创造植物雄性不育系,选择使用花粉或花药特异性表达基延糜谥参镄坌圆挥蚬こ逃稚系挠蠴畔龋、及启动子和花粉特异表达的基因及启动子两大类。端的调控序列全长为,包含了完整的虻钠舳忧张晓国等,谛℃咦臃⒂Φズ似诘幕ㄒ┲刑匾毂泶张晓国等,将舳佑隚基因构建成融合基因,转化烟草从植物发育分子生物学的角度看,植物发育的各个阶段性是植物基因时空调节表达的结果。植物花粉发育过程涉及大量的基因表达,根据玉米、烟草和紫露草的花粉分子杂交动力学的研究表明,花粉内有蚨嘀謒渲刑匾毂很明显这些花粉特异基因和启动子可以在雄性不育的基因工程中应用,同时也可因的调控序列是成功的重要基础。关于这类调控序列的研究较多钍す龋、凌定厚等,榷嘀制舳樱强煞治;ㄒ┨匾毂泶锏幕蚴撬净ㄒ┤拚辈愀叨忍匾毂泶锘颍没蚪鲈谒净ǚ鄯⒂的花粉母细胞减数分裂至单核花粉期表达,基因,っ