文档介绍：第一军医大学
博士学位论文
蛋白质芯片技术对男性不育精浆相关蛋白质群的分析
姓名:孙玲
申请学位级别:博士
专业:人体解剖与组织胚胎学
指导教师:邢福祺
20070418
蛋白质芯片技术对男性不育精浆相关蛋白质群的分析博士研究生:孙玲指导教师:邢福祺教授摘要男性不育是引起不孕症的重要因素之一。据年世界卫生组织报道,在全世界约万对不孕不育夫妇中,男方因素约占%,女方因素约占%,抽样调查,发现男性不育者占.%。导致男子不育的原因非常复杂广泛,涉目前对蛋白组学研究多是采用经典的双向电泳技术,通过蛋白质等电点和分子质量的不同而进行分离,这种方法对于分子质量较大、含量较多的蛋白质展的起来的一项新的蛋白质研究技术,是继基因芯片之后发展起来的生物检验并行性、高通量、微型化和自动化的特点而很快成为研究蛋白质组学的有力工具。其优越性主要表现在:可直接用未经纯化的样品进行分析;样品需求量少,博士学位论文男女双方因素约占%。在我国,根据对河北省个地区杂浞蚋及生殖系统解剖结构和功能、激素调节、遗传物质、感染免疫等诸多因素的异常和障碍。现阶段对这些因素的研究大多停留在单基因水平和基因组水平。然而,机体真正生理机能的执行者是蛋白质,所以上述分子遗传学研究并不能反映基因转录后的调控、蛋白质表达水平的变化以及蛋白质的翻译后修饰等信息,并且细胞内水平和蛋白质的表达峰度并不完全一致,因此从蛋白质水平对男性不育机制进行研究显得特别重要。有很好的分离作用。但不利于小分子质量、微量蛋白质的分离与鉴定。,κ旰蟛欧技术,是蛋白芯片与表面加强激光解吸电离飞行质谱的技术组合。它以其高度,.
多个生物标记物,实现自动化分析;有多种不同表面性质的芯片町供选择,有质群及其作用,因此针对精液异常的男性不育患者,进行精浆的系列比较蛋白制和相互作用网络,是寻找不育原因的一条新思路。进行分类:其中精液正常组例,精液液化延迟组亲枞晕蘧例,严重少精症技罹组>罕瓯纠胄暮蠓掷刖ńSτ肅鞍仔软件分别对精液中文摘要通常只要数微升;灵敏度高,有利于检出低丰度蛋白;高通量,町以快速发现利于发现一些具有特性的蛋白。。受目酊常规检测手段的局限,人们未能从整体上系统地分析精浆中的蛋白组学研究,确立与不育发生相关的重要蛋白质群,,对精液液化延迟、非阻塞性无精症、严重少精症等多种男性不育症患者精浆与正常可生育男性精浆进行检测,比较』下常与各不育组之『白欠翊嬖诓钜斓鞍祝钜斓鞍椎氖考跋嘤Φ姆肿恿俊C植钩9甈白组研究方法对小分子质量、微量蛋白无法检测的缺陷。研究方法本研究中以例精液标本为研究对象,按恫挥曜技觳橛胝锒鲜植帷片捕获蛋白;蛋白质离子化后,用偷鞍字市酒亩粱圆煌榫ń蛋白进行检测,获得各样本的蛋白指纹图谱。应用砑运测蛋白质进行归一化处理,液化延迟组与正常组、非阻塞性无精症组与正常组、严重少精症组与正常组、严重少精症组与非阻塞性无精症组进行统计学分析。比较几组间存在的差异蛋白数量、强度。。
W橛胍夯映僮正常组与液化延迟组比较,有个蛋白表达存在差异。其中在液化迟缓组表达较正常组高的蛋白有个,其分子质量分别为:,在液化迟缓组表达降低的蛋白有觯浞肿又柿糠直鹞#,.还入赘孰淖R泼竿γ福憾Φ鞍浊崃矗幌赴匮趸付嚯摹在无精组除分子质量分别为:.的四个蛋白质表达增高外,其余个差异蛋白质表达均较正常组蛋白质库查询募钢植钜斓鞍祝崾酒渲种蛋白可能是;丝氨正常组与偶见活精组蛋白表达差异不大,.。。黄渲蟹肿又柿课的蛋白质表达明显降低,蛋白质库查询募钢植钜斓鞍祝崾酒渲种蛋白可能是;W橛胛蘧正常组与无精组比较,有个蛋白表达存在差异。降低,F渲蟹肿又柿糠直鹞的龅鞍缀棵飨韵陆担邢灾圆钜欤琍.。酸酶抑制因子颓疤濉W橛肱技罹.,,,.。Ⅱ
偶见活精组与无精组相比,有个蛋白存在表达差异。在无精组表达增高的蛋白有觯浞肿又柿糠直鹞#.在无精组表达降低的蛋白有觯浞肿又柿糠直鹞#鞍字市酒尚惺奔渲势准际蹩梢酝薄⒖焖俣允匝樽橛攵哉兆橹适欠诰阂夯坛艘恍┭芯壳宄慕洗蠓肿又柿康牡鞍字什斡胪猓褂众多小分子蛋白参与这一重要的生理过程。〉木ń屑觳狻状伪ǖ懒司阂夯映倩颊咧谢勾嬖诖罅啃》肿拥鞍字什斡胝庖还蹋素氧化酶多肽。单纯从分子质量范围看,这些小分子蛋白以往的研究均未涉异。均表现为在严重少精组表达降低,其分子质量分别为:.技罹橛胛蘧结论存在差异蛋白进行确定,并可