文档介绍：第卷第期年月种子. . .
玉米总蛋白质提取技术和蛋白质样品浓度测定方法的比较
杨文鹏王明春, 杨留启。王伟
.贵州省旱粮研究所, 贵阳; .贵州省农业生物技术重点实验室, 贵阳
摘要:玉米组织蛋白质的提取及其浓度测定是进行玉米蛋白质组学研究的关键步骤。本研究以玉米叶片和花丝为试材,
从总蛋白提取数量和质量方面比较分析了磷酸缓冲液法、法、改进法、.、
试剂盒法及其改良法等种玉米总蛋白质提取方法。同时。又比较分析了法、
一试剂盒法和紫外分先先度法法等种方法测定蛋白质浓度的准确性。结果表明:总蛋白提取数
量按大小顺序为:试剂盒法试剂盒改良法改进法法法磷酸缓冲液法;总蛋白提取质
量依质量优劣为:试剂盒法试剂盒改良法—法改进法法磷酸缓冲液法;法与
一法测定的蛋白质浓度均是准确的,且没有显著差异;但是法测定的蛋白质浓度欠准确。经综合考虑,
改进法用于分析,试剂盒改良法用于分析,法用于测定蛋白质浓度是经济有效的方法。这
对玉米蛋白质组学的研究具有参考价值。
关键词: 蛋白质提取;蛋白质浓度测定;玉米
中图分类号: 文献标志码: 文章编号: —

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现代生命科学涵盖了生物学、医学、农学等传统学学科相互交叉渗透而产生的新型学科。在自然科学体
科,以及生物学、生物技术、环境科学、社会科学等其他系中,生命科学已成为世纪的带头学科。生命科学
收稿日期:——
基金项目:国家重点基础研究发展计划计划项目:玉米奥帕克一和果穗性状的表达分析及基因的克隆;贵州省农
业科学院专项资金项目黔农科院院专项号:;贵州省科学技术基金黔科合字
号:玉米奥帕克一突变的蛋白质表达分析。
作者简介:杨文鹏一,男,研究员,博士,研究方向:玉米分子遗传学与育种;—:.。
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研究报告杨文鹏等:玉米总蛋白质提取技术和蛋白质样品浓度测定方法的比较
正从基因组学走向功能基因组学。蛋白质组学是功能改进法:将上述法改进为:取.
基因组学的研究热点之一,其兴起影响与推动了生命可调蛋白质提取液同加入离心管,置于
科学学科。在蛋白质组研究中,从组织和细胞中提取冰上预冷。称取组织样品放人研钵中,用液氮研
蛋白是最关键的一步,它影响蛋白的产率、生物活性和磨成粉末,再加人预冷提取液冰浴研磨成浆,之后转入
特定目的蛋白结构的完整性。因此,采用合适的蛋白离心管中混匀,在冰上静置至过夜。℃条件
质提取方法是获得良好蛋白质组分析结果的必要条下离心,/,。提取上清液,再离心
件口工。另外,提取蛋白样品的准确定量对十二烷基次,取上清,℃保存备用或一℃保存。
—,尤其是双—三氯醋酸一丙酮沉淀法:称取
向电泳是非常重要的。组织样品放人研钵中可加入和少量石英
植物组织总蛋白质的提取方法较多,常用的方法砂,用液氮研磨成粉末。再加入一℃预冷的/
,法、提取液含%三氯乙酸和.%的
磷酸缓