文档介绍:气嚼差弋犬等农杆菌介导的蜃;俎T龃笠片及提高耐盐性的研究学位论文耹王垫教援茔些型堂筮蔓弛擅墓直牡生生物越丕动毖越堂皇拉丕堂隧研究合作指导教师:申请学位类别:专业领域名称:所在学院:邳捏霾奎聪教援亟±生:指导教师:方向:年分类号:密级:单位代码:号:
实验以保定苜蓿为受体材料,以农杆菌介导法将乙烯信号传递因子畍谏基因导入苜蓿,并摘要本研究采用基因谭椒ń蚁┬藕糯ǖ菀蜃基因导入苜蓿,以期培育出叶片增大并耐盐的转基因苜蓿,用以改良苜蓿品系,解决盐碱地开发利用问题。裕且恢直怀莆Q滩菀蚁┦芴宓男藕糯ǖ菀蜃樱哂性龃笠镀耐盐的功能。获得叫片明显增大的转基因植株,为增加蛋白质含龃、改良苜蓿品质的育种研究开辟了一条潜在的途径。同时,在转化过程中,对影响转化的各个环节作了进一步探讨,从而进一步完善了高效的曹蓿遗传转化体系。本实验获得转灾仓辍6云渲械暝偕仓杲蠵检测发现,阳性植株为辍6訮剐性植株迸一步作鉴定,结果均为阳性。表明蚣赫系苜蓿基冈组中并且在转录水平上已表达。其中一株转基因植株的叫。片比对照明显增大,经叶片面积测算表明,转基因苜蓿叶片面积为对照的倍,显示山蚓哂性鋈艘睹婊墓δ堋对不同浓度;蛑仓昙岸哉罩仓暌镀杏卫敫彼岬牟舛ū砻鳎;蛑仓曛懈彼岷量高于对照。当盐浓度增加时,脯氨酸含量随着胁迫浓度的增加和时间的增摺关键词:烟草乙烯信号传递冈子┡└司俎#衅龃螅脱
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例乞研究生签名:御时间:洲时间:渺,年涸论淄概钐“年闞I独创性声明关于论文使用授权的说明年码稳C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解中国农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名:导师签名:/
;椒植物遗传转化怯τ弥刈镈技术、细胞组织培养技术或种质系统转化技术,有日的地将外源基因或尾迦氲绞芴逯参锘蜃椋⑹蛊湓诤蟠仓曛得以表达的过程。自从世纪年代以来,特别是年首例转基因作物,臼,目前已有多个国家多例转基因植物己进入或完成田间试验阶段。选择适宜的遗传转化方法是提高遗传转化率的重要环¨之一。尽管转基冈的方法很多,但从遗传转化系统来说,可分为两人类,一类是以载体为媒介的遗传转化,另一类是外源目的闹苯幼;载体系统转化方法└司鶷騌柿=榈挤农杆菌或质粒介导法是迄今植物基冈撼逃τ米疃唷⒆罾硐氲姆椒ā8┡└司泻有质粒,该质粒是穿梭质粒,有一个危碩,它可以整合到植物基冈组上,而迦胪庠碊片段并不影响整合。野生的啊质粒作为基网撼淘靥宀⒉缓鲜剩渲柿H到恢窒拗泼竿惺喔雒盖形坏悖岩灾苯咏谢虿僮鳌A硗庖吧鶷柿R鹱化组织瘤性生长,使植株再生困难。所以后来人们对砸质粒进行改造并发展成一种称之为中间载体的质粒,它可在大肠杆菌中复制并摄入日的基因。使这一载体质粒从大肠杆菌转入根癌农杆菌后,便可用丁农杆菌介导的遗传转化。目前用的大多数是改造后的中问载体质粒。农杆菌介导的植物遗传转化方法主要有以下几种:叶盘法叶箍法是双子叶植物较为常用也较为简单有效的方法。选取健康的无菌苗,用打孔器打出叶圆盘,将带有新鲜伤的叶圆盘与载有日的基因的农杆菌液进行短期共培养,农杆菌通过伤口使携带外源目的基冈的或质粒进入植物细胞。使外源目的基因整合到植物基网组中。真空渗入法将适宜转化的健壮植株倒置浸于装有携带外源目的基因的农杆菌渗入培养基的容器中,经真空处理、造伤、使农杆菌通过伤口感染植株,在农杆菌的介导下,发生遗传转化。这种方法在拟南芥窕缘龋、人白菜、油菜殴恪;缘龋等均有成功地报道。它是一种简便、快速、可靠而且不需要经过组织培养阶段即可获得火量转化植株的基冈转移方法。原生质体法原生质体法是指在原生质培养的早期。将携带外源目的基因的农杆菌与原生质体共同培养,农杆菌的或就会随着外源信号分子的诱导而导入原生质体的核内,就可能整合在受体基因组上。现在,农杆菌介导的植物遗传方法已广泛用丁植物细胞、愈伤组织、中国农业大学硕上学位论文
以适用丁源生质体、叶圆片、悬浮细胞、茎根、胚、愈伤组织等几乎所有具有分生能力的组织或茎切段,子叶一咧周冀明等,纫糯;稀脂质体法脂质体是人工拟造的类脂虻ü檀与磷脂构成的小体,能够跨膜转运,可将核酸包裹起来,免于核酸酶的作用而保持核酸的完整性