文档介绍：药品沉降菌测定法
一目的：为规定生产、质检洁净室（区）中沉降菌测试条件测试方法，特制定本操作规程。
二适用范围：适用于公司生产、质检洁净室（区）的沉降菌的测定和环境的验证。
三责任者：洁净度监测人员、品控部。
四正文：
1 质量指标及每个洁净间培养皿数量培养皿数量（不含对照皿）：
被测区洁净度级别
最少培养皿数
（φ90平皿，）
兽药GMP(2002)要求
最大平均浓度(个/30min·φ90平皿)
100级
10000级
级
级
14点
2点
2点
2点

3
5
*表中所列为最小培养皿数,当房间面积较大时,应酌情考虑增加培养皿数量。
2 测试方法：
方法概述：
本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿中，经一定时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净状况。
所用的仪器、设备
φ90平皿
生化培养箱
注：使用时应严格按照仪器说明书操作；
必须定期对培养箱的温度计进行检定。
条件：净化空调系统在开启状态，房间清洁
培养基：
普通营养琼脂培养基，培养基配制方法见附录。
时间：培养皿沉降30分钟后，用37℃温箱培养24小时。
人员要求：测试人员穿着洁净服，带口罩，手消毒或带手套。动作要轻，避免产生污染干扰。
测试步骤：
采样方法：
放置方法、次序：将已制备的培养皿按要求放置，放置培养皿从总平面中最靠里的房间开始布置，依次向外布，最后人员撤出。每间房间也是从房间最靠里的点开始布置，最后布置门附近的点，然后人员撤出。收取培养皿时次序相反，从最外边的房间开始收，每间房间从最靠门的培养皿开始收，最先布置的皿最后收，沉降时间略有差别。用φ90cm培养皿，在洁净房间内均匀布点测试，另外再布置1点作为对照皿。放置地面上后拿开皿盖，搭放在皿边上，沉降30分钟后，盖上皿盖收起，用37℃温箱培养24小时后，数出测菌落数，得出结论。
对照皿：对照皿放置方法为将皿盖拿开后，马上重新盖上，同样放置30分钟，收起，培养，数菌。除30分钟沉降过程为带盖沉降与测试皿不同外，其余过程均一样。目的是模拟整个检验过程，看培养皿、培养基以及人员操作过程是否对结果有影响。
培养皿放置位置：测试皿、对照皿在洁净间内均匀布置即可，一般放置在地面上，注意乱流洁净室应尽量避开送风口正下方，若有固定设备、仪器（如手术床、灌装机等），可布置在设备上。
培养：
全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。
每批培养应有对照试验，检验培养基本身是否污染。可每批选定3只培养皿作对照组。
菌落计数：
用肉眼直接计数，或在菌落计数器上点，然后用5-10倍放大镜检查，有否遗漏。
若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时，仍以2个或2个以上菌落计数。
注意事项：
测试用具要作灭菌处理，以确保测试的可靠性、